ИММУНИЗАЦИЯ БЕЛКОМ ТЕПЛОВОГО ШОКА-70 ВО ВРЕМЯ ЛАТЕНТНОГО ПЕРИОДА ИНГИБИРУЕТ РОСТ ПЕРЕВИТОЙ МЫШАМ КАРЦИНОМЫ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Белки-шапероны, или белки теплового шока (БТШ), защищают клетки всех известных организмов от широкого спектра стрессовых факторов. БТШ70 без преувеличения можно назвать одним из самых консервативных белков в эволюции; гомология между БТШ70 человека и его бактериальным аналогом составляет 50%. Экспрессия БТШ70 повышается при воздействии самых различных по природе факторов. Интересно, что в человеческих клетках количество БТШ70 достаточно велико и в условиях покоя, причем уровень его базальной экспрессии различен в разных тканях. Особенно много БТШ70 в опухолевых клетках. Потенциальные возможности применения белков теплового шока в диагностике и лечении paковых заболеваний очевидны [1].
Так, уровень экспрессии БТШ70 при инвазивном протоковом paке молочной железы (РМЖ) строго коррелирует с уровнем гормональных рецепторов, стадией и статусом вовлеченных лимфоузлов. Поэтому полагают, что экспрессия БТШ70 играет важную роль при прогрессии РМЖ, что является основанием для разработки новых методов иммунотерапии РМЖ [2].
Известно, что за рубежом уже готовы к клиническим испытаниям вакцины, основанные на комплексах БТШ-70 с дендритными клетками [3]. Поэтому изучение влияния вакцинации БТШ70 во время латентной стадии роста карциномы мыши является актуальной задачей. Целью данной работы было определение влияния вакцинации БТШ70 на проявление перевитой карциномы молочных желёз (КМЖ), её рост и выживание мышей-опухоленосителей.
Человеческий БТШ70 выделяли из биомассы бактериальных клеток как было показано ранее [4]. Для перевивки опухолевых клеток под правую переднюю лапу в область жировой подушечки использовали самцов линии A/Sn собственной разводки в конвенциональных условиях (ИБХ РАН). Было задействовано пять групп животных. Самцам контрольной группы - не вводили ничего; группу 1 вакцинировали
1 раз (6 мкг БТШ70/мышь, n=5), группу 2 - 2 раза (6-14 мкг белка/мышь, n=5), группу 3 - 3 раза (6-14-14 мкг белка/мышь, n=6), группу 4 - 4 раза (6-14-14-14 мкг белка/мышь, n=6, см. Таблицу 1). В каждой группе так же имелись контрольные животные, которым вводили фосфатный буфер (ФБ) одновременно с введением БТШ70 (n=5 в каждой контрольной группе). Иммунизацию производили подкожно под правую переднюю лапу (в область перевивки). Первая иммунизация мышам экспериментальных групп 1-4 была произведена на третий день после перевивки опухоли, каждая последующая - с интервалом в неделю. За животными наблюдали в течение двух месяцев; ежедневно осуществляли контроль качества жизни подопытных мышей; размеры опухоли измеряли два раза в неделю как было показано ранее [5]. Результаты обpaбатывали статистически с помощью программы Excel.
Была обнаружена тенденция к замедлению проявления и скорости роста КМЖ в группах, обработанных ФБ, по сравнению с ростом опухоли у необработанного контроля, однако средняя продолжительность жизни самцов этих контрольных групп различалась не достоверно. Явное замедление проявления опухолей во всех группах, кроме группы 4 было обнаружено начиная с 22-ого дня после перевивки. Размеры КМЖ в 1 и 2 группах были достоверно меньше, чем в контроле, получавшем ФБ. Таким образом, было обнаружено достоверное угнетение процесса проявления опухолей при иммунизации БТШ во время латентного роста перевитой опухоли молочной железы (группы 1 и 2, 1 и 2 иммунизации, соответственно). При проведении 3-4 вакцинаций последние две инъекции попали на время проявления опухолей, что, возможно привело к отмене эффекта угнетения роста опухоли в среднем. Однако и в этих группах были достигнуты поразительные результаты - полная отмена роста КМЖ у 1/6= 17% реципиентов, хотя и в группе 1 (единственная вакцинация на 3й день) у 1/5= 20% животных опухоль также не обнаруживалась. Все контрольные животные погибли к 53 дню после перевивки. Выживание на конец эксперимента представлено в таблице.
Выживание самцов после вакцинации БТШ70 через 2 месяца после перевивки КМЖ
Группа |
n= |
Препарат |
Кол-во |
Выживание |
Излеченные |
0 |
7 |
ничего |
нет |
0 |
0 |
0.1 |
5 |
ФБ |
1 раз |
1/5=20% |
0 |
1.1 |
5 |
БТШ |
1 раз |
4/5=80% |
1/5=20% |
0.2 |
5 |
ФБ |
2 раза |
1/5=20% |
0 |
1.2 |
5 |
БТШ |
2 раза |
2/5=40% |
0 |
0.3 |
5 |
ФБ |
3 раза |
2/5=40% |
0 |
1.3 |
6 |
БТШ |
3 раза |
2/6=33% |
1/6=17% |
0.4 |
5 |
ФБ |
4 раза |
1/5=20% |
0 |
1.4 |
6 |
БТШ |
4 раза |
2/6=33% |
1/6=17% |
На основании полученных данных были сделаны выводы о том, что 1-2 вакцинации выделенным нами человеческим БТШ70 во время латентного периода роста перевитого paка молочной железы замедлили проявление и скорость роста проявившейся КМЖ у мышей-опухоленосителей, что привело к улучшению выживаемости животных по сравнению с обработанным ФБ и непролеченным контролем; при этом доля полностью излеченных животных была незначительной (1/10=10%). Проведение 3-4х вакцинаций отменило эффект ингибирования роста опухоли в среднем, однако не уменьшило долю излеченных животных (2/12=17%).
В итоге, вакцинация выделенным нами человеческим БТШ70 представляется перспективным методом иммунотерапии РМЖ, однако необходимо проведение дальнейших экспериментов (в том числе и на спонтанных мышиных моделях РМЖ) для оптимизации режимов вакцинации и выяснения механизмов обнаруженных эффектов.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Гужова И.В. и др. Шаперон HSP70 и перспективы его использования в противоопухолевой терапии. Цит., 2005; 47(3): 187-199
- Kalogeraki A et al. Correlation of heat shock protein (HSP70) expression with cell proliferation (MIB1), estrogen receptors (ER) and clinicopathological variables in invasive ductal breast carcinomas. J Exp Clin Cancer Res. 2007; 26(3):367-368.
- Gong J et al. A heat shock protein 70-based vaccine with enhanced immunogenicity for clinical use. J Immunol. 2010;184(1):488-496.
- Novoselova TV et al. Treatment with extracellular HSP70/HSC70 protein can reduce polyglutamine toxicity and aggregation. J Neurochem. 2005; 94(3):597-606
- Moiseeva E.V., 2005.Original approaches to test anti-breast cancer drugs using novel set of mouse models. http://igitur-archive.library.uu.nl/dissertations/2005-1130-200033/index.htm
Статья в формате PDF 253 KB...
18 04 2024 11:54:47
Целью настоящего исследования явилось определение с применением новых современных методов биоинформационного анализа места и роли гелиогеомагнитной активности в комплексном биотропном воздействии на организм человека особых экологических факторов высоких широт. Изучалась сезонная динамика рецидивирования хронических заболеваний внутренних органов (стенокардия, гипертоническая болезнь, хронический бронхит, ревматизм) у жителей г. Сургута за пятилетний период. Параллельно отмечалась среднемecячная динамика геомагнитной активности. Проведенный корреляционный анализ в рамках второй, стохастической (вероятностной) парадигмы показал, что суммарная среднемecячная и сезонная динамика геомагнитных колебаний, выявленная при многолетнем наблюдении на территории Югры, играет существенную роль в течении хронических неинфекционных болезней. Однако в рамках второй парадигмы не представляется возможным определить значимость геомагнитной активности в комплексном биотропном влиянии экстремальных экологических факторов. Разрешение данной проблемы возможно только с позиции третьей, синергетической парадигмы. Применение метода идентификации параметров квазиаттpaкторов в фазовом прострaнcтве состояний позволяет в рамках синергетической парадигмы выявить значимость геомагнитных возмущений в комплексном биотропном воздействии на организм человека нeблагоприятных экологических факторов высоких широт. ...
17 04 2024 3:43:24
Статья в формате PDF 101 KB...
16 04 2024 12:12:58
Статья в формате PDF 148 KB...
15 04 2024 14:29:48
Статья в формате PDF 111 KB...
14 04 2024 15:26:41
Статья в формате PDF 119 KB...
13 04 2024 14:44:24
Статья в формате PDF 108 KB...
12 04 2024 18:41:19
На примере самозарастания песчаных карьеров разработана модель, описывающая формирование растительности в ходе первичной сукцессии на территории со сложным рельефом поверхности и соседством контрастных экотопов. ...
11 04 2024 18:41:59
Статья в формате PDF 323 KB...
10 04 2024 3:10:25
Статья в формате PDF 244 KB...
09 04 2024 3:31:21
Статья в формате PDF 311 KB...
08 04 2024 16:17:26
При изучении влияния озона на частоту аберраций хромосом у семян пшеницы различных сортов, хранившихся в условиях озона разные сроки, была выявлена зависимость его цитогенетического воздействия от времени экспозиции. ...
07 04 2024 23:43:11
Статья в формате PDF 239 KB...
06 04 2024 6:27:41
Статья в формате PDF 108 KB...
05 04 2024 19:46:34
Статья в формате PDF 112 KB...
03 04 2024 15:57:28
Статья в формате PDF 108 KB...
02 04 2024 13:53:25
Статья в формате PDF 125 KB...
01 04 2024 17:31:34
Статья в формате PDF 122 KB...
30 03 2024 10:34:42
Статья в формате PDF 140 KB...
29 03 2024 12:56:28
Статья в формате PDF 117 KB...
28 03 2024 20:49:15
Статья в формате PDF 284 KB...
27 03 2024 21:56:59
Статья в формате PDF 135 KB...
26 03 2024 7:20:16
Статья в формате PDF 117 KB...
25 03 2024 12:18:10
Статья в формате PDF 101 KB...
24 03 2024 8:22:33
Статья в формате PDF 126 KB...
23 03 2024 2:26:54
Статья в формате PDF 255 KB...
20 03 2024 9:44:14
Статья в формате PDF 154 KB...
19 03 2024 4:20:29
Статья в формате PDF 112 KB...
18 03 2024 6:27:25
Статья в формате PDF 112 KB...
17 03 2024 6:14:25
Статья в формате PDF 261 KB...
16 03 2024 12:21:19
15 03 2024 14:32:27
Статья в формате PDF 133 KB...
14 03 2024 10:49:55
Статья в формате PDF 164 KB...
12 03 2024 21:29:29
11 03 2024 3:19:34
Статья в формате PDF 142 KB...
10 03 2024 3:38:38
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::