ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ТЕСТОВ В РАЗВЕДЕНИИ ЖИВОТНЫХ
Цитохромоксидаза (цитохромС:О2- оксидоредуктаза, К.Ф. 1.9. 3.1.) тесно связана с митохондриальными структурами. Этот энзим катализирует трaнcпорт электронов в дыхательной цепи с цитохрома С на кислород.
Сукцинатдегидрогеназа (сукцинат:цитохром С - оксидоредуктаза, К.Ф. 1.3.9.1.) - фермент, в состав которого входит ФАД (флавинадениндинуклеотид). Сукцинатдегидрогеназа принимает участие в каталитических превращениях цикла лимонной кислоты.
Двусторонний обмен фосфатами и промежуточными продуктами цикла трикарбоновых кислот идет между митохондриями и цитоплазмой клеток. Необходима компартментализация промежуточных соединений для интеграции и регуляции биологического окисления, гликолиза, ме
таболических путей, к которым относится цикл Кребса [3].
Энергетические превращения в митохондриях способствуют осуществлению биологических функций организма.
Известны немногочисленные исследования активности оксидоредуктаз в митохондриях различных органов сельскохозяйственных животных [2].
В литературе отсутствуют сообщения по изучению активности ферментов в митохондриальной и микросомально-цитозолевой фpaкциях различных органов свиней породы СМ-1 новосибирской селекции, поэтому необходимы исследования в этом направлении.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперимент поставлен в учебно-опытном хозяйстве «Тулинское» при Новосибирском аграрном университете. Объектом для исследования служили свиньи скороспелой мясной породы СМ-1 новосибирской селекции в возрасте 6 месяцев. Животных содержали в соответствии с технологией, предусмотренной для комплексов и ферм. Опытные животные по принципу аналогов были разделены на три группы. В первую группу были включены свиньи линии Светлого, во вторую - Совета, в третью - Сигнала. Изучена активность цитохромоксидазы, сукцинатдегидрогеназы (6,8) в митохондриях, супернатанте печени и сердца свиней. Во время контрольного убоя были взяты пробы тканей у шести животных из каждой группы. Митохондрии изолировали из 10 % гомогената в 0,25 М растворе сахарозы методом дифференциального центрифугирования. Чистоту митохондриальной фpaкции проверяли в фазовом контрасте. Для анализов было взято количество митохондрий, соответствующее 0,1-0,2 мг митохондриального белка. Белок определяли с использованием бычьего сывороточного альбумина в качестве стандарта [7]. Полученные результаты обработаны статистически на PC Intel Celeron 1.3 GHz.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
В эксперименте отмечено превосходство животных линии Светлого по активности цитохромоксидазы в сердце над сверстниками линии Сигала (табл.1) на 8,65 % (p< 0,01).
Молодняк линии Совета по энзиматической активности находился в промежуточном положении между линиями Сигнала и Светлого. Найдено некоторое уменьшение активности фермента у свиней линии Совета по сравнению со Светлым. При изучении активности цитохромоксидазы в митохондриях сердца выявлено максимальное значение ее у подсвинков линии Светлого.
Таблица 1. Активность цитохромоксидазы (ммкМ цитохрома С/мин.мг белка) митохондрий и супернатанта сердца и печени свиней
Группа |
Линия |
Сердце |
Печень |
||
митохондрии |
супернатант |
митохондрии |
супернатант |
||
1-я |
Светлый |
1949,86 + 23,14 |
21, 38 + 0,33 |
504,02 + 9,61 |
4.18 + 0.13 |
|
|||||
2-я |
Совет |
1872,87 + 24,08 |
20,78 + 0.37 |
519,73 + 8,23 |
4.32 + 0,14 |
3-я |
Сигнал |
1794.63 + 21,32 |
22,27 + 0.29 |
471,54 + 10,47 |
4,58 + 0,11 |
В опыте установлена невысокая ферментативная активность в супернатанте сердца у животных всех линий. Наблюдалась тенденция к спаду активности энзима у молодняка линии Совета относительно сверстников Сигнала и некоторое нарастание цитохомоксидазной активности у свиней линии Светлого.
Исследование, проведенное в учхозе «Тулинское», показало увеличение активности цитохромоксидазы в митохондриальной фpaкции печени (табл.1) у подсвинков Светлого в сравнении с животными линии Сигнала на 6,89 % (р< 0,05). Максимальное значение активности фермента обнаружено у молодняка линии Совета , оно было выше на 10,22 % (р< 0,001), чем у сверстников Сигнала. Установлено, что подсвинки всех изучаемых линий имели идентичный и низкий уровень энзиматмческой активности в супернатанте печени.
Изучено изменение активности сукцинатдегидрогеназы в митохондриях и супернатанте сердца и печени свиней разных линий (табл.2).
Более низкая активность фермента была у животных линии Сигнала. Отмечено наибольшее нарастание ферментативной активности в сердце свиней линии Светлого по сравнению с худшим хряком (на 9,83 %, р< 0,001). Несколько меньшая активность изучаемого фермента найдена у подсвинков Совета. Выявлен спад сукцинатдегидрогеназной активности в супернатанте сердца у животных Светлого и Совета относительно Сигнала.
Установлено нарастание активности сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени (табл.2) у молодняка первой и второй экспериментальных групп. Обнаружено превосходство по энзиматической активности свиней Светлого на 12,24 % (р<0,001) по сравнению со сверстниками худшего хряка. У животных второй экспериментальной группы показано уменьшение ферментативной активности в митохондриальной фpaкции печени по сравнению с предыдущей группой.
Таблица 2. Активность сукцинатдегидрогеназы (ммкМ цитохрома С/ мин.мг белка) в митохондриях и супернатанте сердца и печени свиней
Группа |
Линия |
Сердце |
Печень |
||
митохондрии |
суперна-тант |
митохонд-рии |
суперна-тант |
||
1-я |
Светлый |
2833,18 + 42,06 |
23,35 + 0,68 |
1352,20 + 28,15 |
25,18 + 0,54 |
2-я |
Совет |
2711,94 + 36,14 |
22,72 + 0,83 |
1295,16 + 43,27 |
24,02 + 0,77 |
3-я |
Сигнал |
2579,61 + 28,43 |
24,83 + 0,50 |
1204,74 + 31,63 |
26,73 + 0,62 |
Выяснена низкая активность сукцинатдегидрогеназы в супернатанте печени у подсвинков всех изучаемых групп. Было определено падение активности фермента до 24,02 и 25,18 ммкМ цитохрома С/ мин.мг белка у свиней линий Совета и Светлого.
Таким образом, в опыте установлено, что по активности оксидоредуктаз в митохондриальной фpaкции различных органов свиней лучшими являются линии Светлого и Совета.
Изучение межлинейных различий по активности цитохромоксидазы и сукцинатдегидрогеназы в митохондриях различных органов животных показало увеличение активности ферментов у подсвинков линий Светлого и Совета. Это может быть связано с нарастанием обмена энергии, выработки макроэргов, активированием тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования у молодняка этих линий. Подобное предположение может вытекать из имеющихся представлений об участии оксидоредуктаз в процессах биологического окисления [4].
Литература
- Келети Т. Основы ферментативной кинетики/Пер.с англ. - М.: Мир, 1990. - 348 с.
- Кузнецов С.Г. // Новые аспекты участия биологически активных веществ в регуляции метаболизма и продуктивности сельскохозяйственных животных: Тез. докл. Всесоюз.совещ., Боровск, 1991.-С.57.
- Кумс Ю.Ю., Ченас Н.К. Ферментативный перенос электрона: Монография / АН Лит.ССР. Ин-т биохимии - Вильнюс: Мокслас, 1988. - 177 с.
- Ленинджер А. Основы биохимии: В 3 т. /Пер. с англ. - М.: Мир, 1985.Т.2. - 368 с.
- Марри Р., Гренер Д., Мейс П. И др. Биохимия человека: В 2 т.М.: Мир, 1993. - Т.1 - 381 с.
- Hess H.H., Pope A.S. // J. Biol. Chem.,1953.V.204. - p.295.
- Lowry O., Rosebrough N., Farr A.et.al. // J. Biol. Chem., 1951. - V.193. - p.265.
- Potter V. R., Schneidar W. C.// J. Biol. Chem.,1942. - V.142. - p. - 543.
Статья в формате PDF 199 KB...
24 04 2024 13:53:25
Статья в формате PDF 266 KB...
23 04 2024 9:41:44
Статья в формате PDF 130 KB...
22 04 2024 16:27:10
Статья в формате PDF 133 KB...
21 04 2024 4:18:38
Статья в формате PDF 108 KB...
20 04 2024 11:28:42
Статья в формате PDF 268 KB...
19 04 2024 10:17:26
18 04 2024 0:38:53
Статья в формате PDF 133 KB...
17 04 2024 9:18:45
Статья в формате PDF 121 KB...
16 04 2024 18:26:15
Наши исследования показали, что эффективность профилактики кариеса зубов значительно снижается на фоне вторичных иммунодефицитных состояний (ИДС), вызванных ортодонтическим аппаратурным лечением. Предлагаемый метод профилактики позволил купировать иммунодефицитное состояние, возникающее на этапах ортодонтического лечения, и повысить эффективность профилактики кариеса зубов. ...
15 04 2024 6:36:47
14 04 2024 19:29:15
Статья в формате PDF 113 KB...
13 04 2024 18:34:39
Статья в формате PDF 107 KB...
12 04 2024 21:40:32
Статья в формате PDF 157 KB...
11 04 2024 1:11:21
Статья в формате PDF 210 KB...
10 04 2024 9:13:47
Для налаживания лесной аренды и рационализации лесопользования, прежде всего, в части заготовки кругляка выборочными рубками деревьев по долгосрочным проектам освоения лесов, требуется сортиментацию проводить непосредственно в конкретном лесном древостое, причем задолго до проведения самой заготовки древесины. На основе применения биотехнических закономерностей и простой шкалы качества сортиментов показана методика сортиментации лесных деревьев. ...
09 04 2024 22:20:41
Статья в формате PDF 134 KB...
08 04 2024 11:31:58
Статья в формате PDF 129 KB...
07 04 2024 21:43:44
06 04 2024 2:18:26
Статья в формате PDF 257 KB...
05 04 2024 6:59:14
Статья в формате PDF 111 KB...
03 04 2024 4:26:40
Статья в формате PDF 124 KB...
01 04 2024 2:44:17
Статья в формате PDF 221 KB...
30 03 2024 21:20:43
Статья в формате PDF 111 KB...
29 03 2024 23:26:30
Статья в формате PDF 244 KB...
28 03 2024 15:29:27
Статья в формате PDF 117 KB...
27 03 2024 13:22:23
Статья в формате PDF 136 KB...
26 03 2024 16:46:53
Рассматриваются показатели всхожести семян и частота встречаемости патологий митоза проростков лука-батуна (Allium fistulosum. L.), выращенных на почвенных пробах, отобранных на территории Западной Якутии в природных биотопах и в зоне воздействия предприятий горнодобывающей промышленности. Проанализировано 97 проб почвы, 35 000 клеток. Выявлено снижение всхожести семян и повышение показателя мутагенной активности почв на территории, загрязненной в результате деятельности алмaзoдобывающей промышленности и разведки месторождений углеводородного сырья в зоне воздействия всех обследованных предприятий. Это свидетельствует о нарушении цитогенетического гомеостаза вследствие комплексного воздействия негативных факторов антропогенно преобразованной среды. ...
25 03 2024 19:32:22
Статья в формате PDF 109 KB...
24 03 2024 7:25:15
К концу ХХ века накопилось огромное количество фактов и доказательств научной несостоятельности постулатов теории относительности (ТО), положенных в основу физических представлений о структуре микро- и макромира. ТО оторвала науку от изучения природных взаимосвязей, подменив их уравнениями с некими значками без чёткого понимания их сущности: масса, заряд, магнетизм и т.д. Игнорирование законов Природы привело человечество к цивилизационному кризису – нарушено равновесие биосферы. Причина глобальных изменений состоит в том, что антропогенное производство энергии в десятки раз превышает допустимый по законам межсистемного обмена порог. Продолжение технократического развития – тупик, катастрофа. Необходимо новое естествопонимание на основе аксиомы: «Мир построен системно». Структура материального мира определяется взаимодействием непрерывной не материальной вихреобразной среды и дискретных образований материи – элементарных частиц, из которых закономерно и системно построено всё от атомов до звёзд и галактик. ...
22 03 2024 7:51:25
Статья в формате PDF 104 KB...
21 03 2024 15:18:45
Статья в формате PDF 115 KB...
20 03 2024 0:17:54
Статья в формате PDF 112 KB...
19 03 2024 17:43:48
Статья в формате PDF 111 KB...
18 03 2024 10:14:17
Статья в формате PDF 120 KB...
17 03 2024 2:18:45
Статья в формате PDF 104 KB...
16 03 2024 5:15:47
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::