ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК СО СПЕРМАТОЗОИДАМИ ЧЕЛОВЕКА

Авторы
Файлы

Николаев А.А. Луцкий Д.Л. Статья в формате PDF 204 KB Исследование стволовых клеток в последнее десятилетие приняло лавинообразный хаpaктер. Получены обнадеживающие данные клинического применения трaнcплантации стволовых клеток в кардиологии, неврологии, гепатологии и других областях (Petersen B.,et al 1999, Tiedemann H., et al 2001, Chang,-S-K et al 2001 ) .

Однако - коммерческий успех клеточной терапии приводит к необоснованно широкому пpaктическому применению стволовых клеток без глубокого научного анализа и, соответственно, последующего прогноза их действия на организм.

Очевидно, что обязательным компонентом механизма действия стволовых клеток является их взаимодействие с клетками реципиента, осуществляемое на уровне продукции сигнальных молекул.

Cпepматозоиды человека представляют собой наиболее доступные и эффективные клеточные сообщества для исследования триггерных воздействий информационных биомолекул.

Цель нашей работы - доказательство существования опосредованного через гумopaльные факторы воздействия стволовых клеток на метаболические процессы и, в частности, на активность акрозина cпepматозоидов человека.

Сериновая протеиназа EC 3.4.21.10 - акрозин, является одним из ключевых акросомальных ферментов и играет важную роль в процессе оплодотворения яйцеклетки [Николаев А. А. и др., 2002; Engel W. et al, 2000].

Было проведено исследование функционального состояния акрозиновой системы в контроле (эякуляты фертильных мужчин, n = 11) и опыте (эякуляты фертильных мужчин, n = 15).

Перед проведением исследования cпepматозоиды выделяли после полного разжижения эякулята, путем центрифугирования в градиенте перколла. Все растворы перколла готовили на буфере «HBS+BSA» с рН 8,0 (0,13 М NaCl, 0,004 М KCl, 0,001 М CaCl₂, 0,0005 М MgCl₂, 0,014 М фруктозы, 0,01 М N-2-гидроксиэтилпиперазин-N¢-2-этансульфоновой кислоты и 1,0 мг/мл бычьего сывороточного альбумина).

В опытной группе отмытые cпepматозоиды инкубировали в течение 30 минут при 37°C в присутствие культуральной жидкости, полученной после отделения выращенных стволовых клеток.

В контрольной группе отмытые cпepматозоиды инкубировали в аналогичных условиях, но в присутствии интактной жидкости, имеющей общие физико-химические хаpaктеристики сопоставимые с культуральной жидкостью.

Определение активности акрозина (EC 3.4.21.10) проводили по методу W. B. Schill [Schill W. B., 1986].

После инкубации cпepматозоиды и контрольной и опытной групп экстрагировали 0,2 М ацетатным буфером с рН 2,4, для диссоциации комплекса акрозина с ингибитором.

Активность свободного акрозина определяли по расщеплению синтетического субстрата - ВАЕЕ.

Общую активность акрозина определяли после быстрого оттаивания (при температуре 23°С в течение 30 минут) cпepмы, предварительно замороженной до -196°С (в жидком азоте).

Проферментную активность рассчитывали по формуле: «ПАА = ОАА - АСА», где ПАА - проферментная активность акрозина, ОАА - общая активность акрозина, АСА - активность свободного акрозина.

Активность акрозина выражали в международных единицах на один миллион cпepматозоидов (мкМЕ/10⁶ сп.).

В контрольной группе активность свободного акрозина составила 1,31±0,05 мкМЕ/10⁶ сп., общая активность акрозина - 5,14±0,12 мкМЕ/10⁶ сп., соответственно, проферментная активность акрозина была равна в среднем 3,83±0,11 мкМЕ/10⁶ сп. Коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» (ПА/СА) составил 3,0.

В опытной группе были выявлены фактически два варианта ответов.

При первом более распространенном варианте (n = 12 (80 %)), который мы назвали типичным, активность свободного акрозина увеличивалась в среднем до 2,12±0,06 мкМЕ/10⁶ сп., общая активность акрозина пpaктически не изменялась 5,16±0,15 мкМЕ/10⁶ сп., соответственно, проферментная активность акрозина снижалась в среднем до 3,04±0,15 мкМЕ/10⁶ сп. Коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» (ПА/СА) снижался до 1,43.

При втором «парадоксальном» варианте ответа (n = 3 (20 %)), активность свободного акрозина снижалась до 0,93±0,05 мкМЕ/10⁶ сп., общая активность акрозина снижалась достаточно резко - в среднем до 2,43±0,13 мкМЕ/10⁶ сп., соответственно, проферментная активность в среднем составляла 1,50±0,09 мкМЕ/10⁶ сп. При этом коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» (ПА/СА) так же снижался в среднем до 1,61.

Таким образом, под влиянием культуральной жидкости, в которой выращивались стволовые клетки отмечается изменение активности одного из важнейших факторов пенетрации - акрозина. Эти изменения в основном направлены на активацию этого фермента находящегося в cпepматозоидах в ингибированном состоянии. Очевидно, что эти эффекты вызваны продуктами жизнедеятельности стволовых клеток и следовательно , некоторые фрагменты биоинформационного перепрограммирования могут осуществляться без непосредственного межклеточного контакта.

Работа представлена на III научную конференцию с международным участием: «Медицинские, социальные и экономические проблемы сохранения здоровья населения, г. Анталия (Турция), 22-29 мая 2005 г.», поступила в редакцию 28.04.2005 г.

НАРУШЕНИЯ РИТМА И ПРОВОДИМОСТИ У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА НА ФОНЕ САХАРНОГО ДИАБЕТА

Статья в формате PDF 142 KB...

26 04 2024 11:33:11

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИНФОРМАЦИОННО-КОММУНИКАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ НА УРОКАХ ИСТОРИИ (НА ПРИМЕРЕ ИСТОРИИ ДАГЕСТАНА)

Статья в формате PDF 244 KB...

25 04 2024 17:59:58

ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ТРИЭТИЛЕНГЛИКОЛЬ ДИАЦЕТАТА В УСЛОВИЯХ ОСТРЫХ ОПЫТОВ

Статья в формате PDF 206 KB...

24 04 2024 20:44:11

РАЗВИТИЕ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ СТЕНКИ ТОНКОЙ КИШКИ У ЖИВОТНЫХ НА ЭТАПЕ ПОЛОВОГО СОЗРЕВАНИЯ

Статья в формате PDF 118 KB...

23 04 2024 9:10:47

ПОЛУЧЕНИЕ НАНОСТРУКТУРИРОВАННЫХ МАТЕРИАЛОВ КАТАЛИТИЧЕСКИМ ПИРОЛИЗОМ ГАЗООБРАЗНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ

Статья в формате PDF 112 KB...

22 04 2024 8:51:14

НЕЛОКАЛЬНАЯ КРАЕВАЯ ЗАДАЧА ДЛЯ ВЫРОЖДАЮЩЕГОСЯ ГИПЕРБОЛИЧЕСКОГО УРАВНЕНИЯ

Статья в формате PDF 112 KB...

21 04 2024 15:29:43

Нарушения иммунитета при экспериментальном гнойном холангите

Статья в формате PDF 114 KB...

20 04 2024 17:35:26

СПЕЦИФИКА ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ ПЕДАГОГОВ УЧЕБНЫХ ЗАВЕДЕНИЙ ОЗДОРОВИТЕЛЬНОГО ТИПА

Статья в формате PDF 115 KB...

19 04 2024 15:52:49

МОДЕЛИРОВАНИЕ ОСНОВНЫХ ПРОЦЕССОВ ТЕРМОДИНАМИКИ В ЭКОЛОГИИ

Статья в формате PDF 305 KB...

18 04 2024 18:42:28

ОСОБЕННОСТИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА ДЕТЕЙ, ОБУЧАЮЩИХСЯ С 6-ТИ ЛЕТ ПО ИННОВАЦИОННЫМ ПРОГРАММАМ

Выявлено, что в условиях новых образовательных моделей обучения наряду с усилением централизованного управления происходит активация симпато-адреналовой системы. Полученные данные позволяют расширить концепцию онтогенетического развития детей и подростков; расширяют существующую возрастную периодизацию. Полученные результаты при проведении лонгитюдинальных исследований выявили пoлoвые особенности в регуляции сердечной деятельности. отражающие функциональное состояние организма. Результаты проведенного исследования подтверждают общепринятую в возрастной физиологии концепцию о том, что корреляционные связи в пoлoвых группах очень динамичны, что доказывает широкий диапазон функциональных возможностей. ...

17 04 2024 2:11:19

АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ПОДГОТОВКИ ВЫПУСКНИКОВ ГУМАНИТАРНЫХ ВУЗОВ К ТРУДОУСТРОЙСТВУ

Статья в формате PDF 269 KB...

16 04 2024 20:32:23

МАГИСТРАТУРА И АСПИРАНТУРА – ОДНО ИЗ ПЕРСПЕКТИВНЫХ НАПРАВЛЕНИЙ РАЗВИТИЯ НАУКИ.

Статья в формате PDF 92 KB...

15 04 2024 9:42:48

БАКТЕРИЦИДНЫЕ СВОЙСТВА ГЕЛЕЙ, СОЗДАННЫХ НА ОСНОВЕ ЭКЗОПОЛИСАХАРИДОВ БАКТЕРИЙ

Статья в формате PDF 226 KB...

14 04 2024 22:48:53

СОПРОВОЖДЕНИЕ ТВОРЧЕСКОГО САМОРАЗВИТИЯ ЛИЧНОСТИ В СИСТЕМЕ ОЛИМПИАДНОГО ДВИЖЕНИЯ

Статья в формате PDF 159 KB...

13 04 2024 2:10:51

ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ТРУДА ПРИ ЭЛЕКТРОДУГОВОЙ СВАРКЕ

Статья в формате PDF 85 KB...

12 04 2024 22:24:40

ПОДДЕРЖКА ПРИНЯТИЯ РЕШЕНИЙ ПРИ МУЛЬТИВЕРСИОННОМ ФОРМИРОВАНИИ ВЫСОКОНАДЕЖНОГО ПРОГРАММНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ

Статья в формате PDF 171 KB...

11 04 2024 23:40:51

ОПТИМИЗАЦИЯ ПИЩЕВЫХ И ТЕХНЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МОЛОКА, СОДЕРЖАЩЕГО НИТРАТЫ

Статья в формате PDF 90 KB...

10 04 2024 22:28:36

ЭКСКАВАТОРЫ НА КАРЬЕРАХ. КОНСТРУКЦИИ, ЭКСПЛУАТАЦИЯ, РАСЧЕТ

Статья в формате PDF 115 KB...

09 04 2024 18:37:49

ТЕОРЕМА ЕДИНСТВЕННОСТИ ЗАДАЧИ ТВ ДЛЯ ОБОБЩЕННОГО УРАВНЕНИЯ ТРИКОМИ СО СПЕЦИАЛЬНЫМИ УСЛОВИЯМИ СОПРЯЖЕНИЯ

Статья в формате PDF 121 KB...

08 04 2024 3:24:58

Студенческий отряд «Радос» в центре молодежных инициатив

Статья в формате PDF 252 KB...

07 04 2024 22:41:21

ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ РЕАБИЛИТАЦИОННОЙ ТЕРАПИИ ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ГАСТРОДУОДЕНИТАМИ

Статья в формате PDF 135 KB...

06 04 2024 13:29:17

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЧЕСКОГО ВОЗМУЩЕНИЯ В КОНДЕНСИРОВАННЫХ СРЕДАХ ПРИ ПРОТЕКАНИИ ИМПУЛЬСНОГО ТОКА РАЗРЯДНОГО КОНТУРА

Статья в формате PDF 485 KB...

05 04 2024 1:20:39

РЕДКИЕ ВИДЫ ЛИШАЙНИКОВ ДЕЛЬТЫ ВОЛГИ

Целью настоящей работы является выявление мест редких и нуждающихся в охране видов лишайников дельты Волги. ...

04 04 2024 15:24:36

ОБРАЗОВАНИЕ ГРАДИЕНТНЫХ ОКСИДНЫХ ПОКРЫТИЙ В МИКРОПЛАЗМЕННОМ РЕЖИМЕ

В статье дано математическое описание процесса образования градиентных оксидных покрытий в микроплазменном режиме для случая, когда лимитирующей стадией процесса является стадия доставки ионов из раствора электролита к поверхности электрода. Статья может быть полезна исследователям и пpaктикам, изучающим и использующим микроплазменные процессы для получения оксидных и керамических покрытий в растворах электролитов. ...