МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КОЛОНИЙ, ФОРМИРУЕМЫХ СТРОМАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ- ПРЕДШЕСТВЕННИКАМИ, ЦИРКУЛИРУЮЩИМИ В ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ
Предшествующими исследованиями (Кейлис-Борок И.В., 1979; Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А., 1980; Лурия Е.А. с соавт., 1989; Лебединская О.В., 1999 и др.) доказано наличие в биологических жидкостях организма циркулирующих стромальных клеток-предшественников (КОК-ф).
В данной работе исследованы морфологические особенности колоний, формируемых клетками-предшественниками стромы в монослойных культурах одной из важнейших биологических жидкостей - перитонеального трaнcсудата.
Опыты проводились на крысах линии Wistar. Для извлечения клеток перитонеального трaнcсудата забитым животным вводили интраперитонеально 10 мл среды 199, содержащей 250 Ед гепарина и 800 мг гентамицина, затем отсасывали содержимое и пропитывали полость еще раз 10 мл среды. Клеточные суспензии эксплантировали в культуральные матрасы в 5 мл среды α-МЕМ с телячьей сывороткой по 1х105 - 10х106 ядросодержащих клеток на матрас.
Исследовались полные и адгезивные культуры с добавлением фидера и при его отсутствии. В качестве фидера использовали облученные костномозговые клетки морской свинки, содержащие тромбоцитарные ростовые факторы, которые, как известно, необходимы для пролиферации КОК-ф костного мозга мышей и крыс.
Колонии, сформированные циркулирующими в перитонеальном трaнcсудате клетками-предшественниками, окрашивали азур II-эозином и подсчитывали процентное содержание трех типов колоний, содержащих не менее 50 клеток.
Каждая из колоний представляет собой клон, состоящий из фибробластов. Первый тип - компактные колонии - содержат фибробласты, типичные по форме, обладающие высоким пролиферативным потенциалом, что обусловливает их плотное расположение в одном или нескольких центрах. Второй тип - диффузные колонии - хаpaктеризуются наличием в своем составе фибробластов, разобщенных между собой и свободно располагающихся в пределах колонии. Третий тип колонии содержит сквамозные фибробласты - крупные округлые или малоотростчатые клетки с множественными вакуолями в цитоплазме. Три морфологических типа колоний отражают степень пролиферативной активности входящих в них клеток: максимальную - в компактных колониях и минимальную - в колониях, содержащих сквамозные клетки.
Результаты исследований показали, что преобладание того или иного типа колоний зависит от плотности эксплантируемых клеток и наличия фидера в культурах. Максимальное количество пролиферативно-активных компактных колоний наблюдалось при эксплантации 3х105 ядросодержащих клеток при добавлении фидера и от 1х105 до 5х105 клеток на матрас без фидера. Причем введение фидера в культуры с данной концентрацией клеток приводило почти к 100-процентному образованию колоний компактного типа (98,5%). Увеличение количества эксплантируемых клеток до 1,5х106 на матрас при наличии фидера и до 10х106 в полных и адгезивных культурах без фидера вызывало резкий рост числа колоний, содержащих сквамозные клетки.
Таким образом, оптимальное соотношение количества эксплантируемых клеток в культуре и концентрации фидера позволяет в полной мере проявить пролиферативные возможности стромальных клеток-предшественников, выявленных в перитонеальном трaнcсудате крыс.
Статья в формате PDF
116 KB...
17 04 2024 3:18:10
Статья в формате PDF
244 KB...
16 04 2024 1:46:42
Статья в формате PDF
429 KB...
15 04 2024 5:23:49
Статья в формате PDF
243 KB...
14 04 2024 11:47:37
Статья в формате PDF
124 KB...
13 04 2024 18:47:42
Статья в формате PDF
155 KB...
11 04 2024 0:41:16
Статья в формате PDF
242 KB...
10 04 2024 20:36:10
Статья в формате PDF
157 KB...
09 04 2024 12:43:39
Статья в формате PDF
291 KB...
08 04 2024 19:20:44
Статья в формате PDF
89 KB...
07 04 2024 23:45:14
Статья в формате PDF
118 KB...
06 04 2024 21:13:53
Статья в формате PDF
504 KB...
05 04 2024 6:15:52
Статья в формате PDF
111 KB...
03 04 2024 19:36:12
Статья в формате PDF
278 KB...
02 04 2024 0:10:45
Статья в формате PDF
123 KB...
01 04 2024 6:52:37
Статья в формате PDF
273 KB...
30 03 2024 14:11:48
Статья в формате PDF
242 KB...
29 03 2024 6:47:53
Статья в формате PDF
119 KB...
26 03 2024 17:33:52
Статья в формате PDF
133 KB...
25 03 2024 8:46:39
Представлены данные литературы, посвященные изучению консервативной тактике при травматических повреждениях селезенки. Показаны показания и противопоказания и необходимые условия для проведения консервативного лечения таких повреждений.
...
24 03 2024 19:14:45
Статья в формате PDF
163 KB...
23 03 2024 5:27:51
Статья в формате PDF
215 KB...
22 03 2024 20:56:22
Статья в формате PDF
108 KB...
21 03 2024 10:52:19
Статья в формате PDF
172 KB...
19 03 2024 13:31:43
Статья в формате PDF
101 KB...
18 03 2024 5:34:41
Статья в формате PDF
131 KB...
17 03 2024 8:50:56
Статья в формате PDF
221 KB...
16 03 2024 12:48:40
Статья в формате PDF
125 KB...
15 03 2024 2:20:48
Статья в формате PDF
138 KB...
14 03 2024 5:38:14
Статья в формате PDF
103 KB...
13 03 2024 21:36:19
Статья в формате PDF
105 KB...
11 03 2024 1:49:35
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::
