СТАЦИОНАРНОЕ И РОЛЛЕРНО-СУСПЕНЗИОННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МЕЖВИДОВОЙ ГИБРИДНОЙ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК СВИНЬЯ Х ЛОШАДЬ (А4ХL)
Метод гибридизации соматических клеток является одним из перспективных биотехнологических подходов, который находит все более широкое применение в вирусологии и биотехнологии.
В лаборатории клеточной биотехнологии была получена гибридная культура клеток А4хL (почка свиньи ТК- х лимфоциты лошади), состоящие из популяций эпителиоподобного и лимфоцитоподобного типов клеток. Сроки формирования монослоя 3-4 сутки, индекс пролиферации составил - 7,3-8,1, митотический индекс - 30‰. Модальный класс хромосом клеток гибридной культуры А4хL составлял 40 на 20 пассаже. Интервал изменчивости хромосом в клетках на 20 пассаже 30-40 хромосом.
Гибридные клетки А4хL высоко чувствительны к вирусу гepпeса лошадей и ринопневмонии лошадей.
После 16 летнего хранения в жидком азоте восстановлена культура клеток А4хL, заложенная на 10 пассаже. На данный период культура прошла 40 пассажей. Жизнеспособность клеток на 0 пассаже составила 80%. Через 4-5 пассажей восстановлены культурально-морфологические показатели: монослой формировался на 3-4 сутки, коэффициент пересева 1:7-1:8, индекс пролиферации 7,25-8,1.
На цитологических препаратах культура представлена клетками двух типов - эпителиоподобными и лимфоцитоподобными.
Эпителиоподобные клетки полигональной формы, ядра клеток крупные неправильной формы, ядерная мембрана утолщена, количество ядрышек 1-2. Наблюдаются двуядерные клетки. Модальный класс хромосом на 20 пассаже представлен 38 хромосомами, что составляет 51% от общего числа. В процессе стационарного культивирования часть клеток уходит в суспензию и образует конгломераты в питательной среде. Клетки, снятие со стекла и уходящие в суспензию были использованы для получения суспензионных клонов из опорозависимой культуры. Было поставлено 10 опытов с использованием различных питательных сред: ИГЛА МЕМ с 2 наборами аминокислот и витаминов, 199, Игла МЕМ, ДМЕМ и разной концентрации клеток в спинере и роллерных условиях.
В условиях роллерно - суспензионного культивирования, с использованием среды Игла МЕМ с двойным набором аминокислот и витаминов с добавлением сыворотки КРС 15-20%, а также глюкозы(4 гл) и глютамина (600 мкгмл), через двое суток наблюдали увеличение концентрации клеток в 5-6 раз. В суспензии живых клеток было 80%. Через трое суток культивирования наблюдали уменьшение живых клеток.
На цитологических препаратах наблюдали сохранение лимфоцитоподобных клеток.
Статья в формате PDF 110 KB...
25 04 2024 12:16:55
Статья в формате PDF 105 KB...
24 04 2024 21:33:16
Статья в формате PDF 111 KB...
23 04 2024 14:13:14
Статья в формате PDF 474 KB...
21 04 2024 15:51:25
20 04 2024 5:38:16
Статья в формате PDF 116 KB...
19 04 2024 22:16:10
18 04 2024 4:54:55
Статья в формате PDF 125 KB...
17 04 2024 14:55:41
Статья в формате PDF 135 KB...
16 04 2024 17:27:26
Статья в формате PDF 138 KB...
15 04 2024 11:14:11
Статья в формате PDF 119 KB...
14 04 2024 1:57:13
Статья в формате PDF 171 KB...
13 04 2024 21:16:12
Статья в формате PDF 115 KB...
11 04 2024 3:40:59
Статья в формате PDF 140 KB...
10 04 2024 20:59:15
Статья в формате PDF 112 KB...
08 04 2024 22:53:11
Статья в формате PDF 111 KB...
07 04 2024 13:45:47
Статья в формате PDF 116 KB...
05 04 2024 16:14:38
Статья в формате PDF 109 KB...
04 04 2024 9:57:18
Статья в формате PDF 116 KB...
03 04 2024 5:56:32
Статья в формате PDF 125 KB...
01 04 2024 0:24:35
Статья в формате PDF 305 KB...
31 03 2024 4:28:28
Статья в формате PDF 112 KB...
30 03 2024 21:28:12
Статья в формате PDF 281 KB...
29 03 2024 6:55:13
Статья в формате PDF 243 KB...
28 03 2024 14:10:40
Статья в формате PDF 301 KB...
26 03 2024 8:26:51
Статья в формате PDF 128 KB...
25 03 2024 15:15:15
Статья в формате PDF 126 KB...
24 03 2024 11:36:51
Статья в формате PDF 111 KB...
23 03 2024 6:12:19
Статья в формате PDF 105 KB...
22 03 2024 12:34:24
Статья в формате PDF 244 KB...
21 03 2024 6:31:44
Статья в формате PDF 112 KB...
20 03 2024 7:22:21
Статья в формате PDF 414 KB...
19 03 2024 12:53:53
Статья в формате PDF 361 KB...
17 03 2024 19:23:40
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::