СТАЦИОНАРНОЕ И РОЛЛЕРНО-СУСПЕНЗИОННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МЕЖВИДОВОЙ ГИБРИДНОЙ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК СВИНЬЯ Х ЛОШАДЬ (А4ХL) > Полезные советы
Тысяча полезных мелочей    

СТАЦИОНАРНОЕ И РОЛЛЕРНО-СУСПЕНЗИОННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МЕЖВИДОВОЙ ГИБРИДНОЙ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК СВИНЬЯ Х ЛОШАДЬ (А4ХL)

СТАЦИОНАРНОЕ И РОЛЛЕРНО-СУСПЕНЗИОННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МЕЖВИДОВОЙ ГИБРИДНОЙ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК  СВИНЬЯ Х ЛОШАДЬ (А4ХL)

Сафина А.Н. Дьяконов Л.П. Гальнбек Т.В. Статья в формате PDF 111 KB

Метод гибридизации соматических клеток является одним из перспективных биотехнологических подходов, который находит все более широкое применение в вирусологии и биотехнологии.

В лаборатории клеточной биотехнологии была получена гибридная культура клеток А4хL (почка свиньи ТК- х лимфоциты лошади), состоящие из популяций эпителиоподобного и лимфоцитоподобного типов клеток. Сроки формирования монослоя 3-4 сутки, индекс пролиферации составил - 7,3-8,1, митотический индекс - 30‰. Модальный класс хромосом клеток гибридной культуры А4хL составлял 40 на 20 пассаже. Интервал изменчивости хромосом в клетках на 20 пассаже 30-40 хромосом.

Гибридные клетки А4хL высоко чувствительны к вирусу гepпeса лошадей и ринопневмонии лошадей.

После 16 летнего хранения в жидком азоте восстановлена культура клеток А4хL, заложенная на 10 пассаже. На данный период культура прошла 40 пассажей. Жизнеспособность клеток на 0 пассаже составила 80%. Через 4-5 пассажей восстановлены культурально-морфологические показатели: монослой формировался на 3-4 сутки, коэффициент пересева 1:7-1:8, индекс пролиферации 7,25-8,1.

На цитологических препаратах культура представлена клетками двух типов - эпителиоподобными и лимфоцитоподобными.

Эпителиоподобные клетки полигональной формы, ядра клеток крупные неправильной формы, ядерная мембрана утолщена, количество ядрышек 1-2. Наблюдаются двуядерные клетки. Модальный класс хромосом на 20 пассаже представлен 38 хромосомами, что составляет 51% от общего числа. В процессе стационарного культивирования часть клеток уходит в суспензию и образует конгломераты в питательной среде. Клетки, снятие со стекла и уходящие в суспензию были использованы для получения суспензионных клонов из опорозависимой культуры. Было поставлено 10 опытов с использованием различных питательных сред: ИГЛА МЕМ с 2 наборами аминокислот и витаминов, 199, Игла МЕМ, ДМЕМ и разной концентрации клеток в спинере и роллерных условиях.

В условиях роллерно - суспензионного культивирования, с использованием среды Игла МЕМ с двойным набором аминокислот и витаминов с добавлением сыворотки КРС 15-20%, а также глюкозы(4 гл) и глютамина (600 мкгмл), через двое суток наблюдали увеличение концентрации клеток в 5-6 раз. В суспензии живых клеток было 80%. Через трое суток культивирования наблюдали уменьшение живых клеток.

На цитологических препаратах наблюдали сохранение лимфоцитоподобных клеток.



СОЮЗ ФИЗИКИ И ИСКУССТВА (НЕПРЕРЫВНОСТЬ)

СОЮЗ ФИЗИКИ И ИСКУССТВА (НЕПРЕРЫВНОСТЬ) Статья в формате PDF 249 KB...

22 04 2024 2:13:49

АДАПТАЦИЯ ПЕРВОКЛАССНИКОВ К ШКОЛЕ

АДАПТАЦИЯ ПЕРВОКЛАССНИКОВ К ШКОЛЕ Статья в формате PDF 292 KB...

12 04 2024 5:45:51

ОСАДЧЕНКО ИВАН МИХАЙЛОВИЧ

ОСАДЧЕНКО ИВАН МИХАЙЛОВИЧ Статья в формате PDF 111 KB...

09 04 2024 9:47:33

Английский язык в начальной школе

Английский язык в начальной школе Статья в формате PDF 380 KB...

06 04 2024 7:29:12

Разработка варочного котла непрерывного действия

Разработка варочного котла непрерывного действия Статья в формате PDF 415 KB...

02 04 2024 20:54:26

ФУНКЦИИ СЕТЕВОГО ТРОЛЛИНГА

ФУНКЦИИ СЕТЕВОГО ТРОЛЛИНГА Статья в формате PDF 257 KB...

27 03 2024 13:22:43

ПРЕОДОЛЕНИЕ ФОРМАЛИЗМА В ЗНАНИЯХ СТУДЕНТОВ

ПРЕОДОЛЕНИЕ ФОРМАЛИЗМА В ЗНАНИЯХ СТУДЕНТОВ Статья в формате PDF 262 KB...

18 03 2024 2:12:21

Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::