ЭФФЕКТОРНЫЕ YOPS: ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ ЭНТЕРОПАТОГЕННЫМИ ИЕРСИНИЯМИ В ИНТРАЦЕЛЛЮЛЯРНЫХ УСЛОВИЯХ

Целью настоящей работы явилось изучение in vitro особенностей биосинтеза Yop E, Yop H, Yop M, Yop P и Yop T бактериями псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза в условиях, приближенных к внутренней среде фаголизосомы макрофагов млекопитающих.
Для этого микроорганизмы плазмидсодержащих штаммов Y. pseudotuberculosis 71 и Y. enterocolitica КМ-33 выращивали при 37°С в течение 0,5-12 ч на рутинных питательных средах с добавлением 20 mM ионов магния и 0,1 % галактозы [Коробова с соавт., 1985; Straley et al., 1982, 1984, и др.] и снижением рН до 4,0 [Janeway, Travers, 1997], а также при рН 7,0 без добавок для контроля. Продукцию Yops определяли в ДИА с помощью сывороток, полученных ранее [Feodorova, Devdariani, 2001] и путем иммунизации мышей очищенными препаратами Yop H/M и Yop E [Микеров, 1999].
Белок Yop E выявлялся в условиях, имитирующих фаголизосому, только в культуральной жидкости (секретируемая форма) у Y. enterocolitica. У Y. pseudotuberculosis этот белок обнаруживался в следовых количествах. В нейтральных условиях, что, на наш взгляд, больше соответствует внутренней среде фагосомы [Janeway, Travers, 1997], антиген экспрессировался у возбудителя псевдотуберкулеза на поверхности микробной клетки (м. кл.) (мембраносвязанная форма). Кишечноиерсиниозными бактериями белок продуцировался в обеих формах, но в меньших количествах.
Yop H/M не выявлялся у изучаемых микроорганизмов в кислых условиях, однако при нейтральном рН среды он обнаруживался в следовых количествах. Хаpaктерно, что у Y. enterocolitica его синтезировалось несколько больше, хотя он определялся преимущественно на поверхности м. кл.
Yop T у обоих штаммов экспрессировался независимо от условий культивирования. Однако при рН 7,0 у Y. enterocolitica белок присутствовал в культуральной жидкости и на клеточной мембране бактерий, у Y. pseudotuberculosis - только в мембраносвязанной форме. В фаголизосомальных условиях значительное количество белка определялось на поверхности клеток, продукция продолжалась и в культуральную жидкость, но в следовых количествах у обоих микроорганизмов.
Обе формы Yop P у энтеропатогенных иерсиний выявлялись в условиях, имитирующих фагосому. Секретируемая форма антигена обнаруживалась у псевдотуберкулезных бактерий только на ранних этапах культивирования (через 30 мин). У кишечноиерсиниозных бактерий превалировала мембраносвязанная форма белка, секретируемая форма регистрировалась спустя 3 ч. При закислении среды до 4,0 полипептид обнаруживался только на поверхности м. кл. обоих штаммов.
Т.о., в отличие от возбудителей чумы, бактерии вирулентных штаммов псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза в условиях, приближенных in vitro к фаголизосомальным, синтезируют только 2 белковые субстанции (Yop P и Yop T). Однако отсутствие положительной реакции Yop H/M с гомологичными антителами, на наш взгляд, не может говорить об утрате способности микробных клеток синтезировать белок в вышеуказанных условиях. Возможно, указанные антигены, подобно Yop E или фибринолизину [Федорова с соавт., 2004], экспрессируются в какой-либо другой форме, детектируемой иными методами иммунохимического анализа, что открывает перспективу для дальнейших исследований.
Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 03-04-48067.
Работа представлена на научную конференцию с международным участием «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии», ОАЭ (Дубай) 11-18 марта 2005 г.
Статья в формате PDF
106 KB...
21 09 2026 0:34:30
Статья в формате PDF
114 KB...
20 09 2026 22:59:13
Статья в формате PDF
111 KB...
19 09 2026 1:44:32
Статья в формате PDF
124 KB...
18 09 2026 8:35:30
Статья в формате PDF
689 KB...
17 09 2026 1:12:33
Статья в формате PDF
152 KB...
15 09 2026 9:32:44
Статья в формате PDF
111 KB...
14 09 2026 4:53:11
Статья в формате PDF
295 KB...
13 09 2026 6:41:32
Статья в формате PDF
113 KB...
12 09 2026 10:31:12
Статья в формате PDF
129 KB...
11 09 2026 6:13:40
Статья в формате PDF
113 KB...
10 09 2026 7:26:55
Статья в формате PDF 278 KB...
09 09 2026 6:47:48
Статья в формате PDF
298 KB...
08 09 2026 3:51:53
Статья в формате PDF
127 KB...
07 09 2026 12:16:42
Статья в формате PDF
235 KB...
06 09 2026 4:18:29
Статья в формате PDF
284 KB...
05 09 2026 8:55:55
Статья в формате PDF
114 KB...
04 09 2026 21:16:26
Статья в формате PDF
119 KB...
03 09 2026 15:30:27
Статья в формате PDF
114 KB...
31 08 2026 5:54:14
Статья в формате PDF
105 KB...
30 08 2026 14:21:18
Статья в формате PDF
256 KB...
29 08 2026 21:37:20
Статья в формате PDF
294 KB...
28 08 2026 15:47:59
Статья в формате PDF
251 KB...
27 08 2026 11:13:46
Рассматриваются вопросы, связанные с организацией децентрализованной системы финансово-бюджетных взаимоотношений в условиях «де-факто» унитарной модели государственного устройства. Более подробно изучается проблема реализации принципа самостоятельности территориальных бюджетов. Идея субсидиарности в основе функционирования бюджетной системы федеративного типа предполагает вертикальное и горизонтальное выравнивание финансово-бюджетных полномочий. При реализации бюджетной политики федеративного типа соответствующую систему финансово-бюджетных отношений следует рассматривать не как совокупность финансовых механизмов и нормативов, определяющих пропорции и параметры бюджетно-налоговых систем разных уровней, а как средство решения взаимосвязанных задач социальной, экономической и региональной политики с учетом промышленной специализации региональной экономики. Многоуровневое финансово-бюджетное регулирование, осуществляемое в федеративном государстве, объективно порождает различные противоречия, в их числе и несбалансированность федеративной бюджетной системы, которые разрешаются путем создания оптимальных форм и методов управления, регулирования и планирования.
...
26 08 2026 16:23:37
Статья в формате PDF
173 KB...
24 08 2026 19:41:58
Статья в формате PDF
121 KB...
23 08 2026 6:28:56
Статья в формате PDF
267 KB...
22 08 2026 14:33:59
Статья в формате PDF
112 KB...
21 08 2026 8:42:48
Статья в формате PDF
115 KB...
20 08 2026 23:11:18
Статья в формате PDF
100 KB...
19 08 2026 12:56:46
Статья в формате PDF
116 KB...
18 08 2026 14:55:22
Статья в формате PDF
102 KB...
17 08 2026 15:43:52
Формирование эффективной системы работы с детьми, обладающими повышенными естественнонаучными способностями, может стать залогом успешного продвижения экономических и образовательных реформ в нашей стране.
...
16 08 2026 10:46:31
Статья в формате PDF
214 KB...
15 08 2026 17:18:26
Статья в формате PDF
257 KB...
14 08 2026 6:57:36
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::