АНАЛИЗ ФАРМАКОТОКСИЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭТАЦИЗИНА И ДИМЕФОСФОНА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ СТРЕССЕ

1

• Авторы
• Резюме
• Файлы

В.П Балашов. П.П. Кругляков Е.Н. Шувалова В работе исследовали влияние этацизина и димефосфона на cмepтность белых мышей и динамику поведенческих реакций в условиях хронического гиподинамического стресса. Показано токсическое влияние этацизина: увеличение cмepтности животных и негативное влияние на поведенческие реакции. Димефосфон не оказывал влияния на летальность и проявлял стресспротекторное Статья в формате PDF 105 KB

Исследование патогенетических закономерностей стрессорного повреждения организма и разработка принципов его коррекции составляет важное направление современной медицины и биологии. Одной из задач этого направления является исследование побочных эффектов лекарственных средств в условиях стресса. Ее актуальность оформилась в связи с результатами ранее проведенных работ [1, 8], продемонстрировавших принципиальную возможность моделирования итогов длительной антиаритмической терапии у кардиологических больных [10]. В связи с этим целью настоящего исследования явилось оценка фармакотоксикологических свойств этацизина и димефосфона в условиях хронического стресса по тестам летальности животных и их поведения в «открытом поле».

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Работа выполнена на 115 нелинейных белых мышах обоего пола массой 19-26 г. Животные были распределены на 4 группы. Мыши 1 группы (n=10) находились в условиях стандартного содержания (контроль 1). Животные 2 группы (n=38) подвергались хроническому стрессу (контроль 2). Животные 3 и 4 групп (n=32 и 35) помимо стресса получали соответственно димефосфон и этацизин.

Иммобилизационный стресс воспроизводили ежедневным помещением животных в тесные пеналы (объемом 42 мм3) на 6 часов. Длительность эксперимента составила 28 суток. Препараты вводили ежедневно внутрибрюшинно в объеме 0,1 мл в следующих дозах: этацизин - 0,5 мг/кг, димефосфон - 100 мг/кг. В контрольных сериях опытов вводили 0,1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. Дозы исследуемых препаратов соответствовали эффективным терапевтическим [2, 3, 6]. Ежедневно проводили учет cмepтности животных.

Тестирование животных (2-4 групп) в «открытом поле» проводили по методу [5, 9] до стресса, на 7-е, 14-е, 21-е и 28-е сутки после стресса. Регистрировали: число пройденных квадратов, латентный выход, число стоек, число выходов в центр (исследовательская активность) и грумминг. Статистическую обработку проводили методами χ2 и t-критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

На первом этапе работы мы провели оценку летальности животных (рисунок 1).

В первой контрольной серии гибели животных не было отмечено. В контрольной серии 2 cмepтность составила 31,6 %, причем гибель животных происходила с 8-х по 14-е сутки.

Этацизин вызвал гибель 54,3 % животных, что статистически выше (p<0,05) соответствующего показателя в контроле, причем гибель мышей наблюдалась с 1-х по 17-е сутки. Cмepтность на фоне введения димефосфона (31,3 %) оказалась близкой к летальности в контрольной серии 2. Динамика cмepтности мышей также существенно не отличалась от ее динамики в контроле 2. Таким образом, можно отметить отсутствие «летальногенного» эффекта у димефосфона по сравнению с этацизином.

На следующем этапе работы провели сравнительный анализ влияния этацизина и димефосфона на поведенческие реакции мышей при стрессе. Данные приведены в таблице 1.

Таблица 1

Влияние этацизина и димефосфона на динамику поведенческих реакций белых мышей при хроническом стрессе

Условия опыта, доза (мг/кг)	Сутки	Квадраты	Стойки	Грумминг	Выход в центр	Латентный выход
Контроль 2	0	261,3±23,75	25,9±3,73	5,1±0,86	5,4±0,95	3,7± 0,38
	7	136,8±20,54*	4,3±1,43*	8,7±1,16*	1,4±0,41*	9,8± 2,06*
	14	58,1±14,75*	2,1±0,82*	10,5±1,08*	0,5±0,19*	20,2± 4,49*
	21	83,4±15,34*	3,8±1,31*	10,5±1,32*	1,4±0,42*	27,6± 14,34
	28	84,0±13,34*	4,1±1,43*	10,2±1,11*	0,8±0,28*	24,2± 10,51*
Димефосфон, 100	0	284,8±33,67	26,9±4,13	5,7±1,19	5,6±1,02	4,0± 0,59
	7	157,6±29,28*k	7,7±2,39*	7,9±1,11*	2,9±0,94*	8,8± 1,71*
	14	91,9±15,57*k	2,6±0,77*	7,4±1,03	0,5±0,19*	7,0± 1,83k
	21	89,3±27,92*	4,5±1,62*	6,8±1,26	1,7±0,41*	21,2± 0,83
	28	85,6±15,98*	4,6±1,60*	6,6±0,98k	1,1±0,35*	37,4± 8,21
Этацизин, 0,5	0	256,5±30,62	26,3±3,96	5,2±1,21	5,5±0,74	3,9± ,91
	7	78,9±13,48*kd	3,1±1,06*	9,4±1,70*	0,4±0,19*kd	10,8±2,97*
	14	30,9±6,76*d	1,1±0,59*	10,7±1,22*	0,2±0,11*	48,7±21,48
	21	47,7±10,18*	1,1±0,48*	11,2±1,24*d	0,7±0,32*	47,3±22,74
	28	53,3±8,52*	1,5±0,63*	11,9±1,49*d	0,6±0,21*	70,2±24,61*

Примечания: * - отличия от исходных значений достоверны при p<0,05; k - отличия от соответствующего показателя в контроле достоверны при p<0,05; δ - отличия от соответствующего показателя в серии с димефосфоном достоверны при p<0,05.

В контрольной серии опытов, а также в группах животных, получающих этацизин и димефосфон, с 7-х по 28-е сутки стресса число пройденных квадратов достоверно снижалось по сравнению с исходными данными. Однако в группе димефосфона снижение этого показателя было достоверно менее значимым по сравнению с контролем на 7-е и 14-е сутки. Этацизин усиливал стрессопосредованную горизонтальную двигательную депрессию по сравнению с контролем на 7-е сутки и по сравнению с димефосфоном на 14-е сутки.

Во всех группах животных с 7-х по 28-е сутки стресса наблюдалось достоверное снижение числа стоек по сравнению с исходными данными. Достоверных отличий по выраженности данного показателя между 2, 3 и 4 группами животных не отмечали.

Под влиянием стресса у животных существенно возрастал грумминг. В группе, получающей этацизин, его увеличение сохранялось на всем протяжении опыта. На фоне терапии димефосфоном данный показатель достоверно увеличивался лишь на 7-е сутки, после чего наблюдалось его снижение и приближение к исходному уровню. Увеличение грумминга в группе этацизина было достоверно выше, чем в группе димефосфона на 21-е и 28-е сутки.

Во всех исследуемых группах (2 - 4) число выходов в центр поля достоверно снижалось с 7-х по 28-е сутки эксперимента. Этацизин более существенно уменьшал исследовательскую активность животных на 7-е сутки по сравнению с контролем. Достоверных отличий между 2 и 4 сериями опытов не наблюдалось.

В качестве дополнительного критерия для оценки двигательной активности животных использовали время латентного выхода из центрального сектора. Необходимо отметить, что при стрессе у незначительной части животных отмечается выпадение этого вида активности. В контроле у животных, сохранивших способность к выходу из центрального сектора, происходит достоверное увеличение времени выхода на 7, 14 и 28 сутки стресса. В группе димефосфона достоверное увеличение показателя происходило лишь на 7-е сутки, тогда как на 14-е сутки он был достоверно ниже, чем в контроле. Время латентного выхода на фоне терапии этацизином достоверно увеличивалось на 7-е и 28-е сутки эксперимента.

При сравнительном анализе динамики cмepтности и динамики поведенческих реакций можно отметить интересную особенность - максимальная cмepтность животных и депрессия поведенческих реакций в группах 2 - 4 наблюдались в сопоставимые сроки. В связи с этим можно предположить единство патогенетических механизмов общетоксического и нейротоксического действия стресса.

Таким образом, полученные нами данные о динамике летальности, грумминга, показателей двигательной и исследовательской активности животных в условиях стресса соответствуют данным литературы [1, 5, 8]. Результаты проведенных экспериментов свидетельствуют, что в условиях хронического стресса димефосфон в отличие от этацизина не оказывает общетоксического действия. Более низкие показатели cмepтности мышей на фоне терапии этацизином по сравнению с ранее проведенными исследованиями [1, 4] объясняется меньшей продолжительностью эксперимента. Кроме того, димефосфон либо оказывает протективное влияние на стрессопосредованные негативные изменения поведенческих реакций грызунов в тесте «открытое поле», либо не проявляет эффекта в отношении регистрируемых параметров. Напротив, для действия этацизина хаpaктерно усиление эффекта стресса.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Балашов В.П., Шевоpaкова Т.И., Седова Д.Г. и др. Влияние длительной противоаритмической терапии на cмepтность в условиях эксперимента./Тез. Докл. IV Международного славянск. конгресса по электростимуляции и клинической электрофизиологии сердца. С.-Петербург. 2000.//Вестник аритмологии. 2000. № 15. С. 94.
2. Балыкова Л.А., Балашов В.П., Школьникова М.А., Кемаева Н.Н. Эффективность димефосфона при нарушениях ритма сердца у детей.//Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1999. № 2. С. 35.
3. Балыкова Л.А., Маркелова И. А., Балашов В.П., Котляров А.А. Эффективность димефосфона при синдроме слабости синусового узла у детей.//Казанский медицинский журнал. 2001. Т.82. № 6. С. 424.
4. Балыкова Л.А., Балашов В.П., Подеров В.Н., Шевоpaкова Т.И., Седова Д.Г., Верещагина В.С., Курмышева Т.В., Маркелова И.А. Влияние длительной противоаритмической терапии на cмepтность животных и адренергическую регуляцию сердца в эксперименте.//Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины./Материалы II Российской конференции молодых ученых России с международным участием. М. 2001. Т. I. С. 261.
5. Калуев А.В. Стресс, тревожность и поведение (актуальные проблемы моделирования тревожного поведения у животных). Киев: Энигма, 1998. 96 С.
6. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух частях. Ч. I. 12-е изд. М.: Медицина, 1993. 736 С.
7. Панферова Н.Е. Гиподинамия и сердечно-сосудистая система. М: Наука, 1977. 259 С.
8. Шевоpaкова Т.И. Фармакологические эффекты препаратов, обладающих противоаритмической активностью при длительном применении./Дисс. на соискание ученой степени канд. биол. наук. Саранск. 2000. 156 С.
9. Gray J. The psychology of fear and stress.//Me Graw-Hill Book Co. NY. Toronto. 1974. 256 P.
10. Teo K.K., Yusuf S., Furderg C.D. Effects of prophylactic antiar-rhythmic drug therapy in acute miocardial infarction. An overview   of   results   from   randomized   controlled   clinical trials.//JAMA 1993. V. 270. P. 1589.

---