ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА И СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ В ТРАВЕ ОВСА ПОСЕВНОГО
Овес посевной (Avena sativa L.) - однолетнее травянистое растение семейства злаковых. Зерно овса содержит белки, жиры, углеводы (крахмал, клетчатку), минеральные вещества. Овес посевной применяется в диетическом питании в виде овсяной крупы и хлопьев, а также как загуститель и стабилизатор (овсяная камедь) [4]. В народной медицине готовят препараты как для приема внутрь, так и в виде ванн, используют как тонизирующее, мочегонное, желчегонное, антисклеротическое, жаропонижающее и противовоспалительное средство. Использование травы овса посевного в питании человека ограничено.
Целью нашей работы было изучение химического состава травы овса посевного для исследования возможности применения его в качестве пищевой добавки.
По литературным данным в траве овса посевного в большом количестве содержатся аминокислоты, а в зерновках - до 9% крахмала [1,3]. Для идентификации этих соединений используются типовые реакции: взаимодействие крахмала с иодом и реакция аминокислот с нингидрином [2,5].
В настоящем исследовании нами была использована трава овса посевного молочной зрелости, из которой готовили извлечение 70% спиртом этиловым с последующей идентификацией компонентов и их количественным определением. С целью определения веществ флавоноидной природы с одной частью извлечения проводили реакцию с цинковой пылью и кислотой хлороводородной концентрированной. Появление розового окрашивания подтвердило наличие флавоноидов.
Вторую часть извлечения исследовали методом тонкослойной хроматографии в системе хлороформ - метанол - вода (52:28:7). Хроматограмму проявляли в УФ-свете (365 нм) и затем обpaбатывали 5% спиртовым раствором алюминия хлорида. Обнаружены пятна флавоноидов ярко-желтого цвета с Rf 0,44 и 0,57.
В водном извлечении, приготовленном нагреванием сырья на водяной бане при 60°С, обнаружен крахмал по образованию синего окрашивания с 0,1 М раствором иода.
Положительная реакция с нингидрином подтвердила наличие аминокислот в траве овса посевного. Последующее изучение состава водного извлечения проводили методом хроматографии в тонком слое сорбента на пластинках «Сорбфил» в системе растворителей спирт бутиловый - кислота уксусная ледяная - вода (4:1:1).Затем хроматограмму высушивали, обpaбатывали 1% раствором нингидрина в спирте этиловом и нагревали в сушильном шкафу в течение 10 минут. В результате обнаружены три пятна аминокислот розового цвета со значениями RS относительно кислоты глютаминовой: 0,85; 1,00; 1,65. Выбор свидетеля - кислоты глютаминовой - обусловлен тем, что она содержится в сырье в наибольшем количестве.
Нами разработаны условия спектрофотометрического определения аминокислот в траве овса посевного. Исследования проводили на спектрофотометре СФ-56 в кюветах с толщиной слоя 10 мм. Выбирали оптимальное количество 1% раствора нингидрина, концентрацию раствора натрия карбоната (0,25%, 0,05% и 0,025%) и его объем, а также время нагревания на водяной бане. Кроме того, установлено положение максимума светопоглощения (570-590 нм) и пределы концентраций подчинения закону Бугера-Ламберта-Бера (0,01-0,06 мг/мл). Результаты выбора оптимальных условий реакции с нингидрином приведены в таблице 1.
Таблица 1
Оптимальные условия реакции с нингидрином
|
Условия реакции |
Показатели |
|
1. Концентрация раствора натрия карбоната |
0,25% |
|
2. Объем раствора натрия карбоната |
1 мл |
|
3. Объем 1% раствора нингидрина в 95% этаноле |
2 мл |
|
4. Время нагревания |
10 минут |
|
5. Концентрация стандартного раствора кислоты глютаминовой |
0,05% |
|
6. Максимум светопоглощения |
570-590 нм |
|
7. Пределы подчинения закону Бугера-Ламберта-Бера |
0,01-0,06мг/мл |
Для построения калибровочного графика в мерные колбы вместимостью 50 мл помещали 1, 2, 3, 4, 5, 6 мл 0,05% стандартного раствора кислоты глютаминовой (РСО), добавляли 1 мл 0,25% раствора натрия карбоната, 2 мл 1% раствора нингидрина в 95% спирте этиловом, нагревали 10 мин на кипящей водяной бане, охлаждали, доводили водой до метки. Измеряли оптическую плотность на спектрофотометре СФ-56 при длине волны 570 нм в кювете толщиной 1 см относительно воды. Методика определения суммы аминокислот в траве овса посевного Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую колбу вместимостью 200 мл со шлифом, прибавляют 100 мл 70% спирта этилового. Колбу закрывают пробкой, взвешивают с погрешностью 0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 часа. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры, взвешивают, доводят массу до первоначальной 70% спиртом этиловым, извлечение фильтруют.
2 мл извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 1 мл 0,25% раствора натрия карбоната, 2 мл 1% раствора нингидрина в спирте 95% и нагревают 10 минут на кипящей водяной бане, охлаждают, доводят водой до метки. Параллельно в мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл раствора РСО кислоты глютаминовой (0,05%) и поступают, как указано выше. Оптическую плотность полученных растворов измеряют на спектрофотометре при 570 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно воды. Содержание суммы аминокислот в сырье в процентах (Х) в пересчете на кислоту глютаминовую рассчитывают по формуле:
, где
Dx - оптическая плотность испытуемого раствора,
D0 - оптическая плотность раствора РСО кислоты глютаминовой,
m0 - навеска РСО кислоты глютаминовой, г,
mx - навеска сырья, г,
W - потеря в массе при высушивании сырья, %.
Таблица 2
Результаты определения суммы аминокислот в траве овса посевного
|
Dx |
Навеска, г |
Найдено, % |
Метрологические хаpaктеристики |
|
0,141 |
1,0150 |
0,96 |
Х = 0,97 |
|
0,152 |
1,0098 |
1,03 |
Σ(Х-Х)2 = 0,0076 |
|
0,131 |
0,9931 |
0,91 |
S = 0,039 |
|
0,140 |
0,9854 |
0,98 |
Sx = 0,0159 |
|
0,139 |
0,9904 |
0,97 |
Δ = 0,41 |
|
0,143 |
0,9998 |
0,99 |
ε = ±4,22% |
Выводы
Изучен химический состав травы овса посевного. Качественными реакциями обнаружены аминокислоты, крахмал и флавоноиды.
Разработана методика спектрофотометрического определения суммы аминокислот по реакции с нингидрином. Установлено, что в траве овса содержится до 1% аминокислот в пересчете на кислоту глютаминовую.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Казаков А.Л., Хацуков Б.Х. Биологически активные вещества целебных и пищевых растений и их фармакологическая активность.- Нальчик: Изд. КБНЦ РАН, 2000. - 68 с.
- Методы биохимического исследования растений под ред. А.И. Ермакова. - Л.: Агропромиздат, 1987. - 430 с.
- Молчанов Г.И., Молчанова Л.П., Гулько Н.М., Молчанов А.Г., Сулков И.Ф. Съедобные целебные растения. Изд. Ростовского университета, 1994. - С. 202.
- Растительные ресурсы. Рос. Академия наук. - С-Пб.: Наука, 1994. - С. 117.
- Химический анализ лекарственных растений под ред. Н.И. Гринкевича, Л.Н. Сафронича. - М.: Высш. школа, 1983. - 176 с.
Статья в формате PDF
148 KB...
09 12 2024 1:57:23
Статья в формате PDF
137 KB...
08 12 2024 1:59:30
Статья в формате PDF
128 KB...
07 12 2024 19:56:24
Статья в формате PDF
103 KB...
06 12 2024 19:42:53
Статья в формате PDF
141 KB...
05 12 2024 4:15:16
Жизненный цикл зимней пяденицы (Operophtera brumata L.) столь своеобразен, а время появления имагинальной фазы настолько необычно для бабочек, что этот объект всегда привлекал внимание учёных. Интерес усиливается также тем, что зимняя пяденица является массовым вредителем лиственных и древесных пород, значительная часть которых относится к плодовым деревьям.
...
04 12 2024 15:37:34
Статья в формате PDF
147 KB...
03 12 2024 14:45:52
С помощью микроспектральных флуоресцентно-гистохимических методов в тучных клетках эндометрия тела и шейки матки крыс дифференцированы гистамин, серотонин и катехоламины. Определено содержание указанных моноаминов в различные фазы пoлoвoго цикла. Тучные клетки шейки матки по сравнению с ее телом хаpaктеризуются более высоким уровнем моноаминов. Содержания катехоламинов и серотонина в точках зондирования хаpaктеризуются высокой степенью линейной корреляции во все стадии пoлoвoго цикла. Установлена высокая степень положительного хроносопряжения динамики изменений содержания гистамина в тучных клетках и эпителиоцитах эндометрия. Предполагается, что тучные клетки выступают в качестве регулятора биоаминового обмена в эндометрии в течение пoлoвoго цикла.
...
02 12 2024 6:35:59
Статья в формате PDF
103 KB...
01 12 2024 11:28:27
Статья в формате PDF
279 KB...
30 11 2024 15:59:41
Статья в формате PDF
111 KB...
29 11 2024 0:57:33
Статья в формате PDF
129 KB...
28 11 2024 11:34:48
Статья в формате PDF
127 KB...
27 11 2024 19:29:29
Статья в формате PDF
188 KB...
26 11 2024 2:38:25
Статья в формате PDF
128 KB...
25 11 2024 18:20:50
Статья в формате PDF
111 KB...
24 11 2024 10:12:43
Статья в формате PDF
142 KB...
23 11 2024 4:14:24
Статья в формате PDF
308 KB...
22 11 2024 22:36:56
Статья в формате PDF
123 KB...
21 11 2024 11:24:30
Статья в формате PDF
214 KB...
20 11 2024 10:55:45
Рассмотрена экономико-математическая модель конкуренции двух фирм на однородном рынке сбыта с точки зрения теории оптимального управления. Приводится формулировка соответствующей задачи отыскания программного управления, минимизирующего суммарные издержи предприятия, необходимые для достижения заданной рыночной доли на дуополистическом рынке. Дана экономическая интерпретация полученных результатов.
...
19 11 2024 3:33:28
Методика диагональной сегментарной амплитудометрии, заключающаяся в регистрации амплитуды колебаний активного и реактивного сопротивления тканей человеческого организма, широко используемая в медицинской пpaктике, начинает применяться в спорте для контроля за функциональным состоянием спортсменов в различные периоды учебно-тренировочного процесса. Результаты, полученные данным методом, показывают, что различия в проводимости тканей определяются видом спорта, а также квалификацией спортсменов. Проводимость тканей более устойчива в подготовительный период по сравнению с соревновательным. Суммарная нестабильность проводимости тканей выше на соревнованиях более высокого уровня.
...
18 11 2024 1:44:38
Статья в формате PDF
111 KB...
17 11 2024 8:28:30
Статья в формате PDF
90 KB...
15 11 2024 19:24:50
Статья в формате PDF
107 KB...
14 11 2024 1:59:30
Статья в формате PDF
307 KB...
13 11 2024 22:57:37
Статья в формате PDF
379 KB...
12 11 2024 15:29:50
Статья в формате PDF
112 KB...
11 11 2024 13:12:19
Статья в формате PDF
112 KB...
10 11 2024 15:32:40
Целью исследования явился анализ биоэлектрической активности сердца коренных и пришлых дeвyшек Горного Алтая алтайской и русской национальностей по данным электрокардиографии. Выявлено, что длительность интервала QT снижена во всех исследуемых группах, а интервала ТР и комплекса QRS превышает общепринятые значения. Снижение длительности всех интервалов происходит от алтаек к русским пришлым, что может свидетельствовать о более выраженной симпатикотонии среди последних. Расчетные величины показывают существенное несоответствие фактических значений должным, за исключением синусового ритма, который также снижается от алтаек к русским пришлым. Анализ амплитудно-частотных хаpaктеристик указывает на нарушения, связанные с процессами реполяризации, внутрижелудочковой и внутрипредсердной проводимости, а также гипертрофии этих отделов. О гипертрофии отделов сердца и нарушениях внутрижелудочковой проводимости в виде блокады ножек пучка Гиса свидетельствует также положение электрической оси сердца.
...
09 11 2024 18:48:53
Статья в формате PDF
98 KB...
06 11 2024 14:22:16
Статья в формате PDF
120 KB...
05 11 2024 9:30:48
Анализ собственных и опубликованных материалов в отечественной и зарубежной литературе приводит к выводу о возможности организма рыб противостоять негативному влиянию экзотоксикантов. Реальной основой сопротивляемости организма является биокатализ. В этих процессах изменение активности ферментов следует рассматривать в качестве первичной реакции биологически активных веществ, направленной на детоксикацию чужеродных соединений.
...
03 11 2024 8:14:49
Статья в формате PDF
301 KB...
02 11 2024 1:28:18
Статья в формате PDF
114 KB...
01 11 2024 14:23:51
Статья в формате PDF
123 KB...
31 10 2024 21:28:16
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::
