МИТОХОНДРИАЛЬНЫЕ ФЕРМЕНТЫ РАЗНЫХ ОРГАНОВ У СВИНЕЙ

1

• Авторы
• Резюме
• Файлы

Лазарева Л.В. Исследована активность трaнcфераз в митохондриях различных органов трех линий свиней породы СМ-1 новосибирской селекции. Определена активность аспартат-аминотрaнcферазы, аланин-аминотрaнcферазы в митохондриях, супернатанте скелетных мышц, сердца и печени животных. В результате эксперимента установлено, что по активности трaнcфераз в митохондриях лучшими являются свиньи линий Светлого и Совета. Статья в формате PDF 110 KB Митохондрии локализуются в цитоплазме клеток. Для каждого типа клеток хаpaктерно определенное количество митохондрий, но оно меняется в зависимости от функционального состояния и стадии их развития. Значительную часть объема цитоплазмы клетки занимают митохондрии. Энергетические превращения в митохондриях способствуют осуществлению многих биологических функций в организме. В митохондриях найдены собственная ДНК, все виды РНК, рибосомы [2].

Применение фpaкционирования белков сделало возможным изучение полиморфизма у животных [3]. Обнаружены изоферменты многих ферментов, в том числе, аспартатаминотрaнcферезы и аланин-аминотрaнcферазы. Изучению механизмов эволюционных взаимоотношений  и видообразования будет способствовать определение изоэнзимов в качестве генетических и биохимических маркеров.

Митохондрии являются не только поставщиком энергии в клетке, но и выполняют большую роль в интеграции различных обменов веществ. В литературе имеются единичные работы по определению активности трaнcфераз в митохондриях различных органов у сельскохозяйственных животных [1], что послужило основанием для настоящего исследования.

Аминотрaнcферазы - энзимы, катализирующие перенос аминогрупп от аминокислот к кетокислотам, с образованием новых аминокислот. Они участвуют в процессах трaнcаминирования, синтеза и распада аминокислот.

Проанализирована   активность  аспартатаминотрaнcферазы  (L-аспартат:2-оксиглуторатаминотрaнcфераза, КФ.2.6.1.1) и аланинаминотрaнcферазы (L-аланин: 2 оксиглуторатаминотрaнcфераза, КФ. 2.6.1.2) в митохондриях различных органов свиней.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Опыт проведен в учебно-опытном хозяйстве «Тулинское» при Новосибирском аграрном университете на свиньях скороспелой мясной породы СМ-1 новосибирской селекции в возрасте шести месяцев. Объектом для исследования служили свиньи линий Светлого, Совета, Сигнала.

Экспериментальные животные были разделены на три группы по принципу аналогов с учетом происхождения, породности, возраста, живой массы. Содержали свиней в соответствии с технологией, предусмотренной для комплексов и ферм. Были взяты пробы тканей у шести животных из каждой группы во время контрольного убоя. Определена активность аспартатаминотрaнcферазы, аланин-амино-трaнcферазы в митохондриях, супернатанте скелетных мышц, сердца и печени свиней [6].

Митохондрии выделяли из 10 % гомогената в 0,25М растворе сахарозы методом дифференциального центрифугирования. Чистоту митохондриальной фpaкции определяли при помощи фазоконтрастного микроскопа. Белок определяли по методу O.Lowry с использованием в качестве стандорта бычьего сывороточного альбумина [5]. Полученные результаты обработаны статистически на Intel Celeron 1,3 GHz.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Изучение активности аспартатаминотрaнcферазы в митохондриях скелетных мышц показало, что она была ниже у свиней линии Сигнала, чем у сверстников Светлого и Совета (таблица 1).

Величина активности фермента была выше у подсвинков Совета на 12,89 % (р < 0,05).

Наблюдалось некоторое уменьшение активности энзима в супернатанте скелетных мышц у животных линий Светлого и Совета относительно третьей экспериментальной группы.

Таблица 1. Активность аспартат-амиотрaнcферазы (мМ/ мин.мг белка) в митохондриях и супернатанте различных органов свиней

Линия	Скелетныемышцы		Сердце		Печень
	митохондрии	супернатант	митохондрии	супернатант	митохондрии	супернатант
Светлый	76,21 + 3,35	14,15 + 0,52	152,14 + 6,38	28,65 + 0,58	95,52 + 5,72	24,36 + 0,68
Совет	74,32 + 3,62	15,93 + 0,67	144,25 + 8,25	29,13 + 0,62	94,11 + 2,87	23,09 + 0,44
Сигнал	67,45 + 2,81	16,05 + 0,36	140,06 + 7,52	30,08 + 0,73	79,02 + 4,47	25,12 + 0,51

В этой же таблице представлены изменения энзиматической активности в митохондриях сердечной мышцы у молодняка разных линий. Отмечена высокая ферментативная активность относительно митохондриальной фpaкции скелетных мышц у всех опытных животных. Найдено нарастание активности энзима у свиней Светлого на 8,62 % (р<0, 05). Выявлена тенденция к уменьшению активности фермента в супернатанте сердца у сверстников от линии Сигнала до Светлого.

Исследование изменений активности аспартат-аминотрaнcферазы в митохондриях сердца показало довольно высокий уровень ферментативной активности. Активность изучаемого фермента достигла максимума у молодняка линии

Совета и составила 99,52 мМ /мин.мг белка (р<0,05). У свиней линии Совета аспартатаминотрaнcферазная активность была достаточно высокой. Выявлено достоверное уменьшение энзиматической активности в супернатанте печени у сверстников Совета.

В эксперименте установлена низкая активность аланин-амино-трaнcферазы в митохондриях и супернатанте различных органов свиней (таблица 2).

Обнаружено повышение ферментативной активности в митохондриальной фpaкции скелетных мышц у подсвинков Светлого до 13,15 % (р<0,05). Установлено волнообразное изменение активности изучаемого фермента в супернатанте скелетных мышц свиней изучаемых линий.

Таблица 2. Активность аланин-аминотрaнcферазы (мМ/мин.мг белка) в митохондриях и супернатанте различных органов свиней

Линия	Скелетные мышцы		Сердце		Печень
	митохондрии	супернатант	митохондрии	супернатант	митохондрии	супернатант
Светлый	2,70 + 0,10	1,28 + 0,06	3,63 + 0,11	0,95 + 0,13	4,46 + 0,13	1,84 + 0,12
Совет	2,51 + 0,14	1,14 + 0,10	3,78 + 0,10	1,03 + 0,11	4,41 + 0,12	1,69 + 0,10
Сигнал	2,39 + 0,11	1,34 + 0,08	3,32 + 0,10	1,12 + 0,13	4,08 + 0,10	1,98 + 0,09

Выявлено увеличение аланинаминотрaнcферазной активности в михондриях сердца у животных линии Светлого (9,33 %, р<0,05) и еще большее нарастание у молодняка Совета (13,85 %, р<0,01) относительно линии Сигнала. В супернатанте сердца подсвинков отмечено постепенное угнетение активности аланин-аминотрaнcферазы от третьей экспериментальной группы к первой.

Самый высокий уровень энзиматической активности обнаружен в митохондриальной фpaкции печени свиней линии Светлого,он составил 4,46 мМ/мин.мг белка (р<0,05). Несколько меньшая активность относительно контрольных величин установлена в митохондриях печени животных линии Совета (8,08 %, р < 0,05). Достоверное угнетение активности фермента (11,71 %, р <0,05) найдено в супернатанте  печени подсвинков Совета в сравнении со сверстниками Сигнала.

В результате эксперимента обнаружено, что по активности аминотрaнcфераз в митохондриях, супернатанте различных органов свиней лучшими являются животные линий Совета и Светлого.

Более высокая трaнcферазная активность в митохондриальной фpaкции различных органов у молодняка свидетельствует о том, что процессы трaнcаминирования протекают у них более активно. Это связано с усилением биосинтеза белка,а также через цикл трикарбоновых кислот с повышением обмена энергии в тканях [4].

Литература

1. Калачнюк Р. // Свиноводство.-1994.№1.С.11.
2. Крупянко В.И.:  Автореф.дисс. ...д-ра биол.наук.Пущино, 1991.-34с.
3. Наградова Н.К. и др. Мультидомерная организация ферментов.М., 1991.165с.
4. Duee P.H. et al. // Bioch. J.-1994.V.296.P.205.
5. Lowry O. et al.// J. Biol. Chem.1951.V.193.№1.P.265.
6. Reitman S.,  Frankel  S.//  Amer. J. Clin. Pathol.-1957.V. 28.P.56.

---