СПОСОБНОСТЬ ГИСТИДИНА, ТРИПТОФАНА И ТИРОЗИНА ВОССТАНАВЛИВАТЬ СНИЖЕННУЮ ЛИЗОФОСФАТИДИЛХОЛИНОМ АДРЕНОРЕАКТИВНОСТЬ МИОКАРДА И СОСУДИСТЫХ ГЛАДКИХ МЫШЦ

1

• Авторы
• Файлы

Циркин В.И. Пенкина Ю.А. Кашин А.Ю. Проказова Н.В. Статья в формате PDF 107 KB

Известно, что гистидин, триптофан и тирозин повышают β-адренореактивность гладких мышц матки, трахеи, коронарных сосудов млекопитающих и миокарда лягушки [7], а лизофосфатидилхолин (ЛФХ), накапливающийся в клетках при различных патологических состояниях [6,9], снижает β-адренореактивность миокарда крысы [5] и α-адренореактивность гладких мышц (ГМ) почечной артерии коровы [3]/ Цель данной работы - изучить способность гистидина, триптофана и тирозина восстанавливать адренореактивность миокарда крысы и ГМ почечной артерии коровы, сниженную ЛФХ.

Эксперименты с миокардом проведены на 32 полоске правого желудочка сердца крысы. Сокращения полосок вызывали непрерывной стимуляцией от электростимулятора ИСЭ-01 (1 Гц, 5 мс, 25-30 В), а их регистрацию проводили с помощью датчика силы FSL05N2C на «Миоцитографе» [8] при 37^оС и перфузии оксигенированным раствором Кребса (1,7 мл/мин.). Использовали адреналин (5,5х10^{-7 М), ЛФХ (10-5 М), гистидин (1,3х10-5}, 1,3х10^-4, 1,3х10^-3 М, n=11), триптофан (5х10^-6 , 5х10^-5 и 5х10^{-4 М,} n=10) и тирозин (1,1х10^-5, 1,1х10^-4, 1,1х10^{-3 М, (}n=11). Различия оценивали по критерию Уилкоксона, считая их достоверными при p < 0,05 [2]. Установлено (табл.1), что ЛФХ (10^-5 М) не влиял на амплитуду сокращений миокарда крысы, но достоверно снижал положительный инотропный эффект адреналина (5,5х10^-7М), а гистидин, триптофан и тирозин во всех концентрациях восстанавливали его.

Эксперименты на циркулярных полосках почечной артерии коровы также проводились по методике [8] на «Миоцитографе» с использованием механотронов 6МХ1 при 37^оС и непрерывной перфузии раствором Кребса, содержащего бета-адреноблокатор обзидан (Обз., 3,5х10^-6 М). Использовали гистидин (1,3х10^{-4 М,} n=47), тирозин (1,1х10^{-4 М,} n=29) и триптофан (5х10^{-5 М,} n=24). Различия оценивали по критерию Стьюдента, считая их достоверными при p < 0,05 [2]. Установлено, что адреналин (5,5х10^-7 М) за счет активации альфа-АР вызывал устойчивое повышение тонуса полосок, который частично снижался ЛФХ (10^-5 М). Все три аминокислоты снимали альфа-адреноблокирующий эффект (табл. 2).

В целом, результаты опытов с миокардом крысы и ГМ почечной артерии коровы показывают, что ЛФХ снижает α- и β-адренореактивность клетки, а гистидин, триптофан и тирозин восстанавливают их. С учетом представлений о сигнальных системах клетки [1]. полагаем, что адреноблокирующий эффект ЛФХ связан с нарушением передачи сигнала от адренорецепторов (АР) внутрь миоцита, что, вероятно, обусловлено разобщением взаимодействия АР с G-белком вследствие изменения его конформации под влиянием ЛФХ. Очевидно, что гистидин, триптофан и тирозин восстанавливают передачу сигнала внутрь клетки за счет восстановления конформационной структуры G-белка, т.е. за счет выполнения ими функции шаперонов, обеспечивающих, как известно [4], эффективный внутриклеточный фолдинг. Результаты исследований свидетельствуют о наличии сформировавшихся в ходе филогенеза внутриклеточных механизмов сохранения эффективности передачи сигнала от рецептора внутрь клетки. Большую роль в реализации этих механизмов могут играть свободные гистидин, триптофан и тирозин. Это говорит о возможности их использования для восстановления утраченной адренореактивности (и, вероятно, других видов хемореактивности тканей человека и животных)

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Авакян А.Э. Ткачук В.А. // Рос. физиол. журн. 2003. Т.89, №2.С 219-239.
2. Гланц С. Медико-биологическая статистика.- М., 1999.
3. Кашин Р.Ю. и др // Успехи совр. естествознания. 2006. № 11. С 48-49.
4. Мушкамбаров Н.Н., Кузнецов С.Л. Молекулярная биология.- М., 2003.
5. Пенкина Ю.А. и др. Артериальная гипертензия.- 2006. Т.12. №23 (прилож). С 63.
6. Проказова Н.В. и др. // Биохимия. 1998.Т. 63, В. 1. С. 38 - 46.
7. Сизова Е.Н., Циркин В.И. Физиологическая хаpaктеристика эндогенных модуляторов β-адрено- и М-холинореактивности. - Киров, 2006.
8. Циркина В.И. и др. // Доклады РАН, 1997. Т.352, № 1. C. 124-126.
9. Watanabe M, Okada T. // Mol Cell Biochem. 2003.Vol.248, №1-2. Р.. 209-15.

Таблица 1. Средняя амплитуда вызванных сокращений миокарда крысы (в % к фону, М±m) при воздействии адреналина (5,5x10^{-7 М), лизофосфатидилхолина (10-5 М) и различных концентраций гистидина, триптофана и тирозина}

Концентрации аминокислот  (М)	n	Тестирования адреналином, 5,5х10-7 М
		1	2	3	4
		Адр	Адр+ЛФХ	Адр + ЛФХ+АК	Адр
Гистидин
1,3х10-5	11	136,7±6,2*	101,6±7,7а	131,2±10,4в*	123,8±5,7а*
1,3х10-4	11	123,8±5,7*	98,6±5,9а	121,5±7,3в*	114,7±3,9 а*
1,3х10-3	11	114,7±3,9*	101,4±3,5а	119,5±5,3 в*	126,1±5,6 в*
Триптофан
5х10-6	10	158,0±17,8*	102,0±8,1а	121,9±8,9ав*	123,3±9,3*
5х10-5	10	123,3±9,3*	100,0±3,4а	118,7±5,3в*	134,1±8,5 в*
5х10-4	10	134,1±8,5*	96,5±5,0а	117,9±5,8 в*	137,7±11,7 в*
Тирозин
1,1х10-5	11	143,7±11,69*	101,28±5,40а	129,35±6,99*в	123,37±5,19*в
1,1х10-4	11	123,37±5,19*	94,77±8,08а	113,21±7,47в	131,71±5,85*вс
1,1х10-3	11	131,71±5,85*вс	88,21±5,73*а	100,97±6,39ав	142,37±8,19*вс

Примечание: Различия достоверны (p<0,05) с исходным уровнем (*), с 1-м (^а), 2-м (^в) и 3-м (^с) тестированием адреналина (по критерию Уилкоксона)

Таблица 2. Величина (M±m) тонического сокращения циркулярных полосок почечной артерии коровы (в мН и в % к 1-му этапу) на фоне обзидна (3,5х10^{-6 М, Обз) при воздействии адреналина (Адр, 5,5}x10^{-7 М), лизофосфатидилхолина (10-5 М, ЛФХ) и трех аминокислот (АК) - гистидина, триптофана и тирозина}

Аминокислота (АК), 10-5 г/мл	n	Этапы эксперимента
		1	2		3
		Адр+Обз	Адр+Обз+ЛФХ		Адр+Обз+ЛФХ+АК
		мН	мН	%	мН	%
Гистидин	47	19,7±1,8	8,8±1,2*	38,5±5,5*	14,6±1,4*#	88,9±12,8#
Тирозин	29	16,1±0,7	3,7±0,6*	24,0±4,0*	10,2±1,1*#	59,8±7,4*#
Триптофан	24	17,5±1,1	5,3±1,0*	29,6±4,8*	14,7±1,7*#	78,2±12,1*#

Примечание: различия с 1-м (*) и со 2-м этапом (#) достоверны ( р<0,05), по критерию Стьюдента

---