Тысяча полезных мелочей    

ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА ЛИЗОСОМЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА ЛИЗОСОМЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Филипенко П.С. Ивченко Г.С. Филипенко Н.П. Статья в формате PDF 128 KB

В современной панкреатологии доминирует концепция, согласно которой многообразие патологических изменений в организме, возникающих при остром панкреатите, обусловлено высвобождением не только ферментов поджелудочной железы, но и целого ряда медиаторов из гумopaльных и клеточных источников.

Инициирующим фактором острого панкреатита является поступление в ткань поджелудочной железы продуктов панкреолиза, которые помимо прямого гистотоксического эффекта, играют роль триггеров, вызывающих выделение целого комплекса биологически-активных веществ. Возникает порочный круг: гипоксическое нарушение тканевого метаболизма приводит к выбросу вазоактивных веществ, которые усугубляют сосудистые нарушения.

При прогрессировании острого панкреатита развиваются дистрофические изменения в поджелудочной железе, активное участие в которых принимают лизосомы. Лизосомы определяют динамику воспаления, являясь по образному выражению Фриммера "стартовыми площадками воспалительной реакции". Однако влияние биологически активных веществ на лизосомы поджелудочной железы до сих пор остаётся недостаточно изученной.

Целью нашего исследования было: изучить влияние медиаторов биологически активных веществ (гистамин, адреналин, ацетилхолин, липаза, трипсин, химопсин) на лизосомы поджелудочной железы.

Материалы и методы исследования: Опыты были поставлены на 28 собаках. За 15-20 минут до оперативного вмешательства животным проводили премедикацию калипсолом внутривенно из расчета 10 мг сухого вещества на 1 кг массы животного, затем внутрилегочно вводили раствор тиопентала натрия (30 мг на 1 кг массы тела). По достижении глубины наркоза, с соблюдением правил антисептики, верхнесрединной лапаротомией послойно вскрывали брюшную полость. В ткань поджелудочной железы вводили изотонический раствор хлорида натрия, а внутривенно исследуемые биологически активные вещества. После указанных выше манипуляций брюшную полость ушивали наглухо. Контролем служила группа из 4 собак, которым после оперативного вмешательства внутривенно вводили изотонический раствор хлорида натрия. Через час собак обеих групп умерщвляли. В гомогенатах поджелудочной железы исследовали активность кислой фосфатазы (КФ 3.1.3.2.) по De Duve с соав. (1955).

Лизосомы выделяли методом дифференцированного центрифугирования в 0,25 миллилитре сахарозы с 1 милимолем ЭДТА. Реакцию лизосомально-вакуолярного аппарата поджелудочной железы на внутривенное введение некоторых биологически активных веществ определяли по активности маркера лизосом - кислой фосфатазы. При этом определяли свободную, общую активность фермента, осмотическую устойчивость лизосом после инкубации в гипоосмотичной среде сахарозы (0,125 М).

Обсуждение полученных результатов: при введении в целостный организм собак адреналина, ацетилхолина, гистамина, трипсина, химопсина, липазы мы обнаружили, что эти биологически-активные вещества активизируют лизосомально-вакуолярный аппарат поджелудочной железы. Это проявляется в значительном приросте измеряемой общей (удельной) и свободной активности кислой фосфатазы, снижение осмотической устойчивости лизосом. По степени активации лизосом биологически-активные вещества располагаются в следующей последовательности: гистамин>адреналин >ацетилхолин >липаза > химопсин > трипсин.

Подобная ответная реакция лизосом поджелудочной железы на введение в целостный организм биологически-активных веществ свидетельствует об объемном изменении органелл, связанное с увеличением числа более крупных вторичных лизосом (гетеро- и аутофаголизосом), и переходе лизосомальных гидролаз из латентного состояния в активное. Последнее событие возможно только во вторичных лизосомах. При этом отмечаются скрытые признаки лабилизации лизосомальных мембран, обнаруженные по приросту свободной активности кислой фосфатазы после кратковременной инкубации гомогенатов поджелудочной железы в гипоосмотической среде сахарозы. По лабилизирующему действию на лизосомы исследуемые биологически-активные вещества распределились в следующей последовательности: трипсин > ацетилхолин > адреналин > гистамин > липаза > химопсин (таблица 1).

Таким образом, анализ полученных данных показал, что наряду с ферментами (липаза, химопсин, трипсин) в активизации и лабилизации лизосомальных мембран клеток поджелудочной железы при остром панкреатите принимают участие и другие биологически-активные вещества (гистамин, ацетилхолин, адреналин).

Для проверки последствий нарушений внутриорганного кровотока, обусловленного биологически активными веществами, в серии опытов было изучено действие биологически-активных веществ на лизосомы поджелудочной железы.

По существу для поджелудочной железы нами были созданы экстремальные условия, в которых энергетический гомеостаз начинает испытывать трудности, связанные с обеспечением его энергетическими субстратами. В этих условиях лизосомальный аппарат должен включаться в процесс обеспечения клеток поджелудочной железы энергетическим материалом.

Таблица 1. Действие медиаторов биологически активных веществ на активность кислой фосфатазы (мМоль Pi/мг белка за 1 мин.) поджелудочной железы собак (М m)

Исследуемое вещество

Свободная

Общая

Осмотическая устойчивость лизосом

1.изотонический раствор натрия хлорида (контрольная группа)

0,061 0,006

3,391 0,026

0,033 0,004

2. липаза (1 мг на кг массы)

0,864 0,051

р1-2 <0,001

3,426 0,049

р1-2 <0,1

0,182 0,005

р1-2 <0,001

3. химопсин (1 мг на кг массы)

0,342 0,004

р1-3 <0,001

1,509 0,019

р1-3 <0,001

0,158 0,008

р1-3 <0,001

4. трипсин (1 мг на кг массы)

0,120 0,004

р1-4 <0,05

1,124 0,022

р1-4 <0,001

0,894 0,038

р1-4 <0,001

5. ацетилхолин

(1 мг на кг массы)

0,863 0,017

р1-5 <0,001

3,594 0,016

р1-5 <0,05

0,470 0,006

р1-5 <0,001

6. адреналин (1 мг на кг массы)

0,891 0,008

р1-6 <0,001

3,568 0,015

р1-6 <0,01

0,346 0,002

р1-6<0,001

7. гистамин (1 мг на кг массы)

 

2,472 0,009

р1-7 <0,001

26,642 0,077

р1-7 <0,001

0,240 0,01

р1-7 <0,05

 

При введении в целостный организм адреналина, ацетилхолина, гистамина, трипсина, химопсина, липазы мы обнаружили, что эти биологически-активные вещества активизируют лизосомально-вакуолярный аппарат поджелудочной железы. Это проявляется в значительном приросте измеряемой общей (удельной) и свободной активности кислой фосфатазы, снижение осмотической устойчивости лизосом.

Подобная ответная реакция лизосом поджелудочной железы на введение в целостный организм биологически-активных веществ свидетельствует об объемном изменении органелл, связанное с увеличением числа более крупных вторичных лизосом (гетеро- и аутофаголизосом), и переходе лизосомальных гидролаз из латентного состояния в активное. Последнее событие возможно только во вторичных лизосомах. При этом отмечаются скрытые признаки лабилизации лизосомальных мембран, обнаруженные по приросту свободной активности кислой фосфатазы после кратковременной инкубации гомогенатов поджелудочной железы в гипоосмотической среде сахарозы.

Мессенджером, определяющим передачу эффекта биологически-активных веществ в клетку, является цАМФ. Последствием увеличения концентрации цАМФ в клетке будет стабилизация мембран лизосом посредством фосфорилирования их структурных компонентов цАМФ - зависимыми протеиназами. Наблюдаемый в наших опытах противоположный эффект, очевидно, обусловлен активацией гуанилатциклазы, относительным уменьшением цАМФ в цитоплазме клеток и лабилизацией лизосом.

По мнению ряда авторов, внутриклеточный уровень цАМФ, цГМФ зависит от активности фосфодиэстераз, превращающих циклические нуклеотиды в нециклические. Синтез циклических нуклеотидов так же зависит от внутриклеточного соотношения АТФ и ГТФ. Нарушение микроциркуляции в поджелудочной железе при остром панкреатите сопровождается снижением поступления в клетку молекулярного кислорода и глюкозы, концентрация АТФ значительно уменьшается и формируется ацидоз.

Основными причинами ацидоза при О2 дефиците является образование ионов Н+ в результате гликолиза: глюкоза 2 лактат + 2Н+, снижение утилизации ионов Н+ вследствие уменьшения синтеза АТФ. Умеренный ацидоз
(рН=6,2-5,8) уменьшает активность катехоламин-стимулированнной аденилатциклазы и образование цАМФ, угнетается активность фосфолипаз.

При блокирование аэробного процесса энергообразования, расходование внутриклеточного АТФ достигает 86,9 %. Образующиеся продукты имеют более кислый хаpaктер, чем исходные. Резко возрастает активность гуанилатциклазы, уменьшается содержание цАМФ, увеличивается лабилизация лизосомальных мембран и солабилизации ферментов. Следовательно, отрицательное смещение энергетического баланса клеток поджелудочной железы является метаболической основой развития панкреатита и в последующем панкреонекроза.

Необходимо отметить, что наиболее выраженный повреждающий эффект на лизосомы поджелудочной железы отмечен у гистамина. Это подтверждает предположение об его участии в повреждении поджелудочной железы при остром панкреатите. Высвобождение гистамина одна из первых реакций тканей на повреждение. Эффекты этого медиатора проявляются уже через несколько секунд после действия повреждающего агента, в результате чего (после почти мгновенной вазоконстрикции) быстро развивается вазодилятация и появляется первая волна увеличения проницаемости сосудов, миграция лейкоцитов, увеличение проницаемости мембран лизосом в поджелудочной железе при остром панкреатите.

Повышение симпато-адреналовых влияний на клетки поджелудочной железы увеличивают активность интрацеллюлярных липаз, способствуют накоплению жирных кислот и тем самым увеличивают интенсивность ПОЛ. При значительной активации ПОЛ, когда окислительной трaнcформации подвергается значительная часть липидов и фосфолипидов, физико-химическая и ультраструктурная организация мембран лизосом нарушается, происходит дестабилизация мембран лизосом и выход из них гидролитических ферментов. Всё это в итоге приводит к аутолизу субклеточных структур клеток поджелудочной железы.

Наблюдаемое в наших опытах повышение активности лизосомально-вакуолярного аппарата под действием ацетилхолина осуществляется путем его связывания с рецепторами на мембране клеток поджелудочной железы, увеличением активности гуанилатциклазы и повышением внутриклеточного цГМФ. В дальнейшем происходит стимуляция лизосом через систему микротрубочек и увеличение количества вторичных лизосом аутофагического типа и лабилизация мембран лизосом.

Изучая последствия взаимодействия ферментов поджелудочной железы с ее лизосомами, мы обратили внимание, что по лабилизирующему действию на лизосомы на первом месте стоит трипсин, затем липаза и химотрипсин. Трипсин и химотрипсин осуществляют каталитическое расщепление пептидов избирательным образом. Трипсин гидрализует только те пептидные связи, в образовании которых участвуют карбоксильные группы лизина и аргинина. Химопсин (аморфный химотрипсин), содержащий смесь α- химотрипсина и трипсина, от трипсина отличается тем, что расщепляются преимущественно связи, образованные остатками ароматических аминокислот (тирозин, триптофан, фенилаланин, метионин). Химопсин активируется в щелочной среде кишечника под влиянием трипсина, который гидролизует четыре пептидные связи и удаляет из молекулы химотрипсиногена два дипептида. В результате образуется активный химотрипсин. Низкая протеолитическая активность химопсина, в наших опытах, очевидно, обусловлена отсутствием в этот момент активного трипсина и высоких значений pH.

Существующие в литературе мнения о трипсине как основном "триггере" острого панкреатита не подтвердились нашими исследованиями. При его введении в целостный организм обнаружено наименьшее увеличение свободной и общей активности кислой фосфатазы.

Таким образом, при введении в целостный организм адреналина, ацетилхолина, гистамина, трипсина, химопсина, липазы мы обнаружили, что эти биологически-активные вещества активизируют лизосомально-вакуолярный аппарат поджелудочной железы. Это проявляется в значительном приросте измеряемой общей (удельной) и свободной активности кислой фосфатазы, снижение осмотической устойчивости лизосом.



РЕГУЛЯЦИЯ ИММУННОГО ОТВЕТА ОПИОИДНЫМИ ПЕПТИДАМИ

РЕГУЛЯЦИЯ ИММУННОГО ОТВЕТА ОПИОИДНЫМИ ПЕПТИДАМИ Статья в формате PDF 98 KB...

06 08 2026 23:34:46

Экобиоморфный состав флоры мелов

Экобиоморфный состав флоры мелов Статья в формате PDF 130 KB...

05 08 2026 17:24:19

УСТАНОВКА ДЛЯ ВЗРЫВНОГО МЕТАНИЯ СТРУИ ЖИДКОСТИ

УСТАНОВКА ДЛЯ ВЗРЫВНОГО МЕТАНИЯ СТРУИ ЖИДКОСТИ Статья в формате PDF 764 KB...

04 08 2026 2:29:11

ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНЫЕ ИНТЕРНЕТ-ТЕХНОЛОГИИ (учебник)

ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНЫЕ ИНТЕРНЕТ-ТЕХНОЛОГИИ (учебник) Статья в формате PDF 106 KB...

03 08 2026 22:17:44

АНАЛИЗ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПРИ ЭКСТРУДИРОВАНИИ ДРЕВЕСНО-НАПОЛНЕННЫХ КОМПОЗИЦИОННЫХ МАТЕРИАЛОВ (ДПКТ)

АНАЛИЗ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПРИ ЭКСТРУДИРОВАНИИ ДРЕВЕСНО-НАПОЛНЕННЫХ КОМПОЗИЦИОННЫХ МАТЕРИАЛОВ (ДПКТ) Проведены исследования в области экструдирования многокомпонентных смесей из отходов различных производств, предложена технологическая схема линии по получению ДПКТ. Экспериментальные исследования проводились в два этапа и определялись параметры процесса – производительность, мощность сил полезного сопротивления, в зависимости от угловой скорости вращения шнека пресса-экструдера, от температуры экструдируемого материала, от влажности экструдируемой смеси и процентного содержания компонентов смеси. ...

30 07 2026 18:41:12

БОШЕНЯТОВ БОРИС ВЛАДИМИРОВИЧ

БОШЕНЯТОВ БОРИС ВЛАДИМИРОВИЧ Статья в формате PDF 114 KB...

28 07 2026 15:56:42

ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ МОЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ В АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ

ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ МОЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ В АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ Астpaxaнская область является зоной эндемичной по мочекаменной болезни. За последние годы, по данным литературы, экологическое состояние области ухудшилось, назрела проблема загрязнения волжского водного бассейна. Анализ заболеваемости и распространенности мочекаменной болезни указывает на существенный рост данных показателей в период с 1991 по 2004 годы среди взрослого населения и подростков, особенно в Черноярском, Приволжском и Лиманском районах Астpaxaнской области. Выявленный рост заболеваемости мочекаменной болезни требует решения медико-социальных проблем и проблем, связанных с экологическим нeблагополучием области. ...

27 07 2026 11:35:41

ИНТЕГРАЦИЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ИЗОНИАЗИДА В ХИМИОТЕРАПИИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ

ИНТЕГРАЦИЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ИЗОНИАЗИДА В ХИМИОТЕРАПИИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ Предложен метод межреберного внутримышечного введения препаратов с непосредственным ультразвуковым «метод глубокого фонофореза», или лазерным воздействием «метод глубокого фотофореза» на место инъекции по рентгенологической проекции воспалительной зоны, и изучены механизмы их лечебного действия у больных деструктивным туберкулезом легких с выраженным пневмофиброзом и патологией органов пищеварения. Создание в очаге туберкулезного поражения повышенной концентрации изониазида повышает эффективность химиотерапии туберкулеза легких в условиях выраженного пневмофиброза изученными методами на 18%. ...

19 07 2026 21:33:10

АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА СУХИХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ СЫРЬЯ ВИДОВ РОДА VERONICA L.

АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА СУХИХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ СЫРЬЯ ВИДОВ РОДА VERONICA L. Статья посвящена вопросам изучения антимикробных свойств природных биологически активных соединений – флавоноидов и фенолкарбоновых кислот, извлекаемых методом вихревой турбоэкстpaкции из сырья растений рода Veronica L. (сем. Scrophulariaceae Juss.) ПреДypaлья. На основании проведенного исследования авторы делают вывод о возможности применения растительного сырья Veronica L. в медицинской пpaктике. ...

17 07 2026 14:59:27

О ВЗАИМОДЕЙСТВИИ ДВИЖУЩИХСЯ ТЕЛ

О ВЗАИМОДЕЙСТВИИ ДВИЖУЩИХСЯ ТЕЛ В статье рассматривается взаимодействие тел при различных скоростях и делается вывод о несправедливости постулата о постоянстве скорости света относительно любой системы отсчета. Дается также понятное с точки зрения классической механики объяснение зависимости длины и времени от скорости. ...

11 07 2026 8:48:28

АЛГОРИТМ РАСЧЕТА МОДИФИЦИРОВАННОЙ ГЕРТ-СЕТИ

АЛГОРИТМ РАСЧЕТА МОДИФИЦИРОВАННОЙ ГЕРТ-СЕТИ Статья в формате PDF 130 KB...

10 07 2026 8:21:39

ЛЕОНТЬЕВ ВИКТОР ЛЕОНТЬЕВИЧ

ЛЕОНТЬЕВ ВИКТОР ЛЕОНТЬЕВИЧ Статья в формате PDF 175 KB...

09 07 2026 18:37:37

МИНЕРАЛОГИЧЕСКИЕ И ГЕОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ НЕОГЕНОВЫХ ОЗЕРНЫХ ОТЛОЖЕНИЙ В ЧУЙСКОЙ И КУРАЙСКОЙ КОТЛОВИНАХ ГОРНОГО АЛТАЯ

МИНЕРАЛОГИЧЕСКИЕ И ГЕОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ НЕОГЕНОВЫХ ОЗЕРНЫХ ОТЛОЖЕНИЙ В ЧУЙСКОЙ И КУРАЙСКОЙ КОТЛОВИНАХ ГОРНОГО АЛТАЯ Приводятся данные по содержаниям магнетита, ильменита, лейкоксена, циркона и аутигенных минералов – лимонита, пирита, марказита в неогеновых озерных отложениях. Рассматриваются некоторые особенности минерального и химического состава неогеновых глин, и содержания в них химических элементов. На основании минералогических и геохимических особенностей делается вывод, что осадконакопление происходило в глубоких теплых и бессточных солоноватых озерах в условиях щелочной восстановительной среды и сероводородного заражения. Постепенно растущая аридизация климата в неогене неоднократно прерывалась периодами повышенной увлажненности. При этом отложения кошагачской и туерыкской свит накапливались на трaнcгрессивном этапе развития неогеновых озер, а бекенской – на регрессивном. ...

08 07 2026 20:30:16

ПОЛИТОЛОГО-СОЦИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МЕТАФОРЫ

ПОЛИТОЛОГО-СОЦИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МЕТАФОРЫ Статья в формате PDF 111 KB...

07 07 2026 15:32:46

Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::