ОСОБЕННОСТИ МЕТОДА ИЗМЕРЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНОГО НАТЯЖЕНИЯ КРОВИ ЖЕРЕБЦОВ

1

• Авторы
• Резюме
• Файлы

Довженко Н.А. Зайцев С.Ю. Максимов В.И. Зарудная Е.Н. Милаёва И.В. Савина А.А. Чудаков Д.Б. Новым методом в диагностике болезней и оценке физиолого-биохимического статуса организма животных является определение динамического поверхностного натяжения (ПН) сыворотки крови. У лошадей разного пола, возраста и породы ПН имеет ряд особенностей. Установлено, что у жеребцов разных пород наблюдаются отличия в изменениях ПН сыворотки крови с возрастом, наиболее выраженные в возрасте 7–8 лет. Наиболее специфичным показателем породы и возраста является угол наклона начального и конечного участка тензиограммы, что может быть использовано в пpaктике в качестве экспресс-контроля возраста и породы лошадей по пробам крови. При проведения измерений были получены высокие значения ПН при малых временах существования поверхности для некоторых групп животных, что может быть связано с особым соотношением компонентов (белки, липиды, соли и др.) в сыворотке крови. Статья в формате PDF 289 KB

Одна из основных задач медицины и ветеринарии - своевременное выявление и лечение патологических состояний организма, поэтому ведётся поиск новых, более совершенных методов ранней диагностики болезней. Одним из перспективных является метод определения динамического поверхностного натяжения (ПН) биологических жидкостей организма (крови, мочи и др.) [1-4]. В состав этих жидкостей входят поверхностно активные и инактивные соединения, содержание которых изменяется в процессе роста и развития организма, во время болезни, что отражается в изменении значений ПН [3].

Целью работы было изучить особенности динамического поверхностного натяжения крови жеребцов разного возраста различных пород.

Материалы и методы исследования

Для определения видовых и породных особенностей ПН у спортивных лошадей была исследована сыворотка крови жеребцов, принадлежащих КСК «Созидатель», Московской области. Поверхностное натяжение определяли методом максимального давления в пузырьке на приборе ВРА-1Р при временах «существования» поверхности раздела фаз σ₀ (t → 0), σ₁ (t = 0,02 с), σ₂ (t = 1 с), а σ₃ (при t → ∞, равновесное ПН), рассчитывали углы наклона кривой начального (λ₀) и конечного (λ₁) участков кривой [1, 4].

Для проведения исследований были сформированы группы из животных-аналогов:

1. Жеребцы тpaкененской породы в возрасте от 3 до 11 лет.
2. Жеребцы ахалтекинской породы в возрасте от 3 до 11 лет.
3. Жеребцы разных пород в возрасте 7-8 лет.

Кровь для исследований брали утром, натощак, из ярёмной вены. Животные находились в состоянии покоя.

Результаты исследования и их обсуждение

Для всех возрастных групп жеребцов тpaкененской породы наблюдается плавное снижение значений ПН при увеличении времени «существования» поверхности от 72,46-74,65 до 59,68-62,92 мН/м. У животных в возрасте 5-6 лет значения ПН при малых (σ₀ и σ₁) и средних (σ₂) временах увеличиваются на 3-4%, а при больших временах (σ₃) - на 8% по сравнению с жеребцами 3-4 лет (табл. 1). В возрасте 7-8 лет при больших временах (σ₃) ПН снижается на 2,3%. В возрасте 10-11 лет значения ПН при всех временах существования поверхности снижаются на 1-2%. Ещё более существенно изменяются значения углов наклона кривых. Значения углов наклона начального участка кривой (λ₀) у жеребцов тpaкененской породы к 5-6 годам возрастают на 18%, а к 10-11 годам снижаются на 52%. Значения углов наклона конечного участка кривой (λ₁) снижаются в возрасте от 3-4 до 5-6 лет на 41%, а к 10-11 годам возрастают на 40%, но не достигают значения λ₁ для жеребцов 3-4 лет (табл. 1). Таким образом, изменения значений λ₀ и λ₁ происходит антибатно и являются наиболее хаpaктеристическими параметрами для лошадей данной породы.

Таблица 1 Средние значения ПН сыворотки крови жеребцов тpaкененской породы

Возраст, лет	3-4	5-6	7-8	10-11
n	4	5	3	4
σ0, мН/м	72,46 ± 0,02	75,04 ± 0,14	74,65 ± 0,14	73,64 ± 0,04
σ1, мН/м	71,85 ± 0,14	73,87 ± 0,13	73,84 ± 0,18	72,51 ± 0,16
σ2, мН/м	65,56 ± 0,12	68,11 ± 0,09	67,90 ± 0,21	66,86 ± 0,03
σ3, мН/м	59,68 ± 0,21	64,40 ± 0,15	62,92 ± 0,23	61,91 ± 0,40
λ0, мН∙м-1с-1/2	10,9 ± 0,3	12,9 ± 0,2	10,6 ± 0,3	6,2 ± 0,4
λ1, мН∙м-1с1/2	5,9 ± 0,2	3,5 ± 0,2	4,7 ± 0,3	4,9 ± 0,3

При исследовании сыворотки крови жеребцов ахалтекинской породы (табл. 2) в возрасте от 3-4 до 7-8 лет отмечается увеличение значений ПН при средних (σ₂) и больших (σ₃) временах «существования» поверхности на 4% и снижение к 10-11 годам σ₂ на 6,6%, а σ₃ - на 4%. Значительные отличия для жеребцов ахалтекинской породы разных возрастных групп наблюдаются и в значениях углов наклона тензиограмм. В возрасте от 3-4 до 5-6 лет значения угла наклона начального участка кривой (λ₀) снижаются на 70%, а конечного - (λ₁) на 32%. Для жеребцов от 5-6 до 7-8 лет оба угла наклона увеличиваются в среднем на 68-78%., а к 10-11 годам снижаются λ₀ - на 14%, а λ₁ - на 30% по сравнению с жеребцами 3-4 лет. Изменения значений λ₀ и λ₁ происходят симбатно и являются отрицательной чертой для лошадей данной породы.

Таблица 2 Средние значения ПН сыворотки крови жеребцов ахалтекинской породы

Возраст, лет	3-4	5-6	7-8	10-11
n	5	4	4	4
σ0, мН/м	75,58 ± 0,16	72,56 ± 0,21	77,17 ± 0,18	72,76 ± 0,03
σ1, мН/м	73,89 ± 0,13	71,75 ± 0,35	76,37 ± 0,67	71,47 ± 0,51
σ2, мН/м	67,23 ± 0,22	67,13 ± 0,41	70,00 ± 0,52	65,39 ± 0,28
σ3, мН/м	61,06 ± 0,26	63,18 ± 0,17	63,66 ± 0,28	60,78 ± 0,38
λ0, мН∙м-1с-1/2	16,8 ± 0,2	5,1 ± 0,3	9,1 ± 0,3	7,8 ± 0,5
λ1, мН∙м-1с1/2	5,6 ± 0,2	3,8 ± 0,4	6,4 ± 0,2	4,5 ± 0,2

Таким образом, у жеребцов разных пород наблюдаются отличия в изменениях ПН сыворотки крови с возрастом, наиболее выраженные в возрасте 7-8 лет. Для более детального изучения породных особенностей ПН были сформированы ещё три группы жеребцов ольденбургской, ганноверской, английской чистокровной породы. Средние значения ПН для жеребцов пяти пород в возрасте 7-8 лет представлены в табл. 3.

При всех временах существования поверхности значения ПН были на 5-7% выше у жеребцов-ахалтекинцев, а для других пород отличались незначительно, в пределах ошибки измерений. Значения углов наклона кривых имеют более существенные отличия, так λ_{0 у} жеребцов тpaкененской породы на 70%, а у ахалтекинцев на 50% больше, чем у животных других породных групп. Минимальные значения λ₁ (4,7 ± 0,4 мН∙м^-1с^1/2) получены у жеребцов тpaкененской и английской чистокровной пород, на 10% больше они у животных ганноверской и на 30% - у ольденбургской и ахалтекинской пород.

Таким образом, значения углов наклона кривых являются наиболее специфическими показателями, значительно отличающимся у жеребцов одного возраста, но разных пород.

Таблица 3 Средние значения ПН сыворотки крови жеребцов разных пород (возраст 7-8 лет)

Порода	Тpaкененская	Ольденбургская	Ганноверская	Английская чистокровная	Ахалтекинская
n	3	4	5	6	4
σ0, мН/м	74,65 ± 0,22	72,34 ± 0,21	73,59 ± 0,69	72,65 ± 0,32	77,17 ± 0,18
σ1, мН/м	73,84 ± 0,27	72,03 ± 0,35	72,44 ± 0,13	71,52 ± 0,34	76,37 ± 0,67
σ2, мН/м	67,90 ± 0,11	66,22 ± 0,21	67,83 ± 0,15	66,92 ± 0,24	70,00 ± 0,52
σ3, мН/м	62,92 ± 0,24	59,90 ± 0,05	62,47 ± 0,23	62,20 ± 0,24	63,66 ± 0,28
λ0, мН∙м-1с1/2	10,6 ± 0,1	6,4 ± 0,3	5,35 ± 1,11	5,9 ± 0,2	9,1 ± 0,3
λ1, мН∙м-1с1/2	4,7 ± 0,4	6,7 ± 0,3	5,15 ± 0,03	4,7 ± 0,4	6,4 ± 0,2

Кроме выше перечисленных особенностей ПН сыворотки крови жеребцов в процессе проведения измерений были получены высокие значения ПН при малых временах существования поверхности для некоторых групп животных. Так значения σ₀ для жеребцов тpaкененской породы в возрасте 7-8 лет и ахалтекинской породы в возрасте 3-4 и 7-8 лет на 5-7% выше, чем ПН воды (72-73 мН/м), которое считается базовым. Такое повышение значений σ₀ можно объяснить, используя системы, моделирующие сыворотку крови лошадей.

Исследуя ПН растворов альбумина в концентрациях, близких к сыворотке крови лошадей (30-80 г/л), установлено, что при времени «существования» поверхности около 0,1 с происходит повышение значения ПН на 1-2 мН/м над контролем (для дистиллированной воды), что может быть связано с влиянием нескомпенсированного электрического заряда адсорбированных молекул белка при низких степенях заполнения поверхности, когда понижение ПН вследствие адсорбции пренебрежимо мало. При добавлении хлорида натрия и лецитина к растворам белка при определенных соотношениях, близким к физиологическим нормам, повышенные значения ПН в область предельно малых времён сохраняются [1]. Такие же данные были получены ранее другими авторами, при исследовании растворов белка по методу измерения «формы капли» [5].

По-видимому, высокие значения σ₀ для некоторых групп животных связаны с особенностями супрамолекулярной системы, состоящей из белков, липидов, солей и др. сыворотки крови.

Заключение

Показано, что поверхностное натяжении сыворотки крови жеребцов имеет возрастные и породные особенности. Наиболее специфичным показателем породы и возраста является угол наклона начального и конечного участка кривой. Определение этого показателя перспективно для использования в пpaктике наряде с другими методами для экспресс-контроля физиолого-биохимического статуса жеребцов по пробам крови.

Список литературы

1. Зайцев С.Ю. Исследование поверхностного натяжения модельных систем и крови животных методом межфазной тензиометрии / С.Ю. Зайцев, В.И. Максимов, И.В. Милаёва, Р. Миллер // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2007. - №2. - С. 44-46.
2. Зарудная Е.Н. Анализ физико-химических показателей сыворотки крови собак / Е.Н. Зарудная, В.И. Максимов, С.Ю. Зайцев, Н.А. Довженко, О.С. Белоновская // Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии, фармакологии и медицине. Т.1.: сборник статей Второй международной научно-пpaктической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине» (Россия, Санкт-Петербург, 26-28.10.2011). - СПб.: Изд-во Политехн. ун-та, 2011. - С. 89-90.
3. Казаков В.Н. Межфазная тензиометрия биологических жидкостей в терапии / В.Н. Казаков, О.В. Синяченко, Г.А. Игнатенко. - Донецк: Донеччина, 2003. - С. 15-126.
4. Максимов В.И. Особенности некоторых физиологических показателей сыворотки крови лошадей в связи с полом и возрастом / В.И. Максимов, С.Ю. Зайцев, И.В. Милаёва, С.А. Козлов, Р. Миллер // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. - Казань, 2006. - Т.185. - С. 208-213.
5. Chen P. Interfacial tensions of protein solutions using axisymmetric drop shape ***ysis / P. Chen, R.M. Prokop,
   S.S. Susnar at al. // in «Proteins at Liquid Interfaces», in «Studies in Interface Science», D. Mobius and R. Miller (Eds.). - 1998. - Vol. 7. - P. 303-339.

---