ОСОБЕННОСТИ РЕГЕНЕРАТОРНЫХ ПРОЦЕССОВ КОЖИ ПРИ ТЕРМИЧЕСКИХ ОЖОГАХ

1

• Авторы
• Резюме
• Файлы

Имашева А.К. Лазько М.В. Регенеративная медицина использует различный клеточный материал для замещения клеток поврежденных тканей при различных поражениях, в том числе ожогах. В статье приведены разные технологии лечения, с использованием пуповинной крови и синтомициновой эмульсии. Термический ожог - чаще встречающееся и серьезное воздействие на покровную систему. Исходя из актуальности проблемы, разработали экспериментальную модель нанесения ожогов и накожной аппликации биологически активных веществ. Статья в формате PDF 115 KB

В повседневной суете кожа человека подвержена различным повреждениям. Это связано с прямым контактом ее с окружающей средой. В коже хорошо развиты процессы репаративной регенерации, в основе которых лежат механизмы миграции и митотического деления эпидермальных клеток и клеток дермы (фибробластов) [2]. Проблемой восстановления поврежденных тканей занимаются с давних пор и получены важные результаты.

Однако, в последнее время участились случаи термического поражения кожи из-за взрывов, пожаров, и это требует быстрой и качественной терапии. Целью нашего исследования явилось изучение репаративной возможности покровных тканей при термических ожогах в условиях воздействия биологически активных веществ (БАВ) пуповинной крови [1,5].

Объектом исследования явились крысы-самки популяции Вистар со средней массой 200-215 г. Все манипуляции проводили под гексеналовым наркозом (80 мг/кг, в/б) [3]. Термические ожоги вызывали путем наложения 30 сек на кожу межлопаточной области спины волосяного покрова, нагретой в течение 1 мин (100° С) медной монеты, присоединенной к паяльнику, диаметром соприкосновения 2 см². Через сутки на месте ожогов возникали раны в виде изъязвлений, заполненных некротическими массами, что соответствует III АБ степени ожога у человека [4].

Начиная со 2-го дня эксперимента, на раневую поверхность ежедневно наносили синтомициновую эмульсию и приготовленную свежую пуповинную кровь. В качестве контроля использовали крыс с ожоговыми ранами, не получавших мазевые аппликации (без воздействия), и животных, которым на раны наносили ВЭО. С интервалом 3-6 дней измеряли площадь раневой поверхности путем зарисовки краев раны на приложенном к ней стерильном предметном стекле и применяли методику компьютерной гистоморфометрии на автоматизированном морфометрическом комплексе «Морфолог». Статистическую обработку результатов всех исследований проводили с использованием t-критерия Стьюдента. Различия средних считали значимыми при уровне вероятности не менее 95 % (в таблицах отмечены звездочками - * - 95%, **- 99%,***-99,9%).

Хаpaктер течения репаративного процесса оценивали визуально в дни измерений площади ран, а также по результатам гистологического исследования кожи, иссеченной из краев раны в конце 3-й недели. На автоматизированном морфометрическом комплексе «Морфолог» оценивали толщину росткового слоя ЭП в краях эпителизации ран по результатам не менее чем 30 для каждой группы животных и клеточную плотность дермы. Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием t-критерия Стьюдента. Различия средних считали значимыми с уровнем вероятности
не менее 95% (в таблицах отмечены
звездочкой).

При аппликациях мазей с биологически активными веществами пуповинной крови рожениц [6] на раневую поверхность уже в начале 2-й недели после нанесения термического ожога имела место более выраженная в сравнении с контрольными группами животных, тенденция к уменьшению площади раневой поверхности (табл. 1, стр. 7).

Полная эпителизация раневой поверхности ранее всего наблюдалась у отдельных животных при аппликации синтомициновой эмульсией.

Одной из причин более быстрого заживления ожоговых ран при использовании аппликаций с БАВ пуповинной крови человека является, на мой взгляд, их стимулирующее влияние на клеточную пролиферацию в эпителии кожи, на что косвенно указывают результаты измерения толщины росткового слоя Эп в краях эпителизации.

Так, через 3 недели после начала эксперимента у животных без воздействия и при аппликации пуповинной крови этот показатель составил соответственно 23,8 ± 0,8 мкм и 22,2 ± 0,8 мкм. Толщина росткового слоя Эп после использования синтомициновой эмульсии в этот же период наблюдения составила 33,6 ±1,0 мкм. Вероятность различий с показателями в контрольных группах животных составила 99,9%.

Во всех случаях в зоне раны отмечены признаки воспаления: расширение сосудов дермы под раневой поверхностью и ее клеточная инфильтрация, выраженные, однако, неодинаково в различных группах. В обеих контрольных группах и у животных, получавших ВЭО, отмечалось большое количество серозно-гнойного экссудата, содержащего преимущественно нейтрофилы и локализованного под поверхностными некротическими массами и вблизи края эпителизации. При использовании синтомициновой эмульсии полнокровие сосудов было менее выражено, гнойный экссудат отсутствовал.

Результаты анализа клеточного состава дермы под раневой поверхностью через 3 недели после нанесения ран (табл. 2, стр. 7) коррелируют с указанными выше особенностями течения раневого процесса при использовании разных аппликаций.

Так, в сравнении с животными контрольных групп, суммарное число клеточных элементов в дерме, подсчитанное на поле зрения микроскопа, значимо снижается при аппликации синтомициновой эмульсией. При этом наблюдается отчетливо выраженный сдвиг в сторону клеток фибробластического ряда, что в совокупности свидетельствует о более быстром разрешении в этих условиях воспалительного процесса, развивающегося в месте ожога.

Таким образом, накожные аппликации в составе мягких лекарственных форм оказывают ранозаживляющее действие, модифицируя течение воспалительного процесса в сторону активизации фибробластической реакции [3].

Таблица 1. Динамика изменений площади ожоговых ран (в см²) при использовании разных аппликаций (п=12)

Экспери ментальные группы	Дни наблюдений после начала аппликации
	До аппликации		3-й		12-й		18-й		28-й¹
Без воздей- Ствия	5,78±0,23		5,45±0,30		2,52±0,25		1,32±0,07		0,85±0,12
Пуповинная кровь с БАВ	6,01±0,20		5,48±0,19		2,07±0,20		1,18±0,08		1,00±0,21
Синтомициновая эмульсия	6,46±0,26	4,79±0,24*		1,52±0,11**		0,66±0,05**		0,27±0,10**
ВЭО	6,01±0,20	5,48±0,19		2,07±0,20		1,18±0,08		1,00±0,21

Примечание: *) - на данный срок наблюдения п=8.

Таблица 2. Клеточная плотность (М±т) и соотношение различных типом клеток (в %) на единицу площади дермы через 3 недели после нанесения ожоговой раны и разных аппликаций

Группы животных	Клеточная плотность	Доля клеток
		Воспалительного инфильтрата	Фибробластического ряда
Без воздействия	78,9±3,3	72,9 %	27,1 %
ВЭО	87,3±-6,3	67,5 %	32,5 %
Пуповинная кровь с БАВ	83,3± 5,7	60,9 %	39,1 %
Синтомициновая эмульсия	47,4±3,5*	48,4 %	51,6 %

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Владимирская Е.Б., Майорова С.А., Румянцев С.А.,Румянцев А.Г. Биологические основы и перспективы терапии стволовыми клетками.- М.: ИД МЕДПРАКТИКА-М, 2005.- 393 с.
2. Данилов Р.К., Графова Г.Я., Хилова Ю.К и др. Морфофункциональные особенности регенерации кожи крыс после огнестрельного повреждения // Морфология,1998. - Т.113, № 3- с.41.
3. Ефимов Е.А. Посттравматическая регенерация кожи (экспериментальное исследование).- М.: Медицина, 1975.- 167 с.
4. Ноздрин В.И., Белоусова Т.А., Альбанова В.И., Лаврик О.И. Гистофармакологические исследования кожи. М.: Изд. ЗАО «Ретиноиды», 2006 г.- 376 с.
5. www.cellules souches.fr.
6. Smith A.M., Revel M. L´Utilisation des cellules souches embryonnaires pour la recherché therapeutique. Paris: BIO-7/00/GT-1/2 (Rev.3) 2001, - 20 p.

---