АТОМНО-СИЛОВАЯ МИКРОСКОПИЯ КАК МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ СТРУКТУРНЫХ СВОЙСТВ КАРБОГИДРАЗ
Для исследования особенностей надмолекулярной организации ферментов в настоящее время успешно применяются различные сочетания классических методов биохимического анализа и современные биофизические подходы, в том числе метод атомно-силовой микроскопии (АСМ). Объектом исследований является инулиназа из Kluyveromyces marxianus Y-303, которая гидролизует инулин и другие фруктозосодержащие полимеры. Данный фермент может использоваться для получения фруктозы из инулинсодержащего растительного сырья, а изготовленные из инулина фруктозные сиропы применяются в кондитерской промышленности, в лечебном питании, а также для профилактики сахарного диабета, кариеса и ожирения.
Гомогенность фpaкций фермента и его субъединиц контролировали электрофоретическим анализом. Содержание белка определяли методом Лоури, каталитическую активность энзима измеряли спектрофотометрически. Визуализацию олигомерной структуры инулиназы осуществляли с помощью атомно-силовой микроскопии на сканирующем зондовом микроскопе SOLVER P47PRO фирмы НТ-МДТ. Для изучения четвертичной структуры фpaкции фермента инкубировали с додецилсульфатом натрия (ДСН) в концентрации 3,5·10-5 моль/л. При гель-хроматографии на колонке с сефадексом G-150 субъединицы выходят двумя пиками, что свидетельствует об асимметричности их строения. Кажущаяся молекулярная масса субъединиц равна 54,8 кДа и 8,4 кДа. Установлено, что они обладают каталитической активностью 1,35±0,21 ед/мг и 1,05±0,23 ед/мг соответственно.
Нами были получены изображения молекул инулиназы на пластинках свежесколотой слюды. Показано, что данный белок имеет олигомерную структуру и состоит из двух субъединиц, различных по размеру. Длина глобулы намного превышает ее высоту, возможно, что такое уплощение молекулы происходит за счет многоточечного связывания заряженных аминокислотных остатков, расположенных на поверхности белка, с поверхностью слюды. Показано, что высота большей субъединицы (54,8 кДа) превышает высоту малой (8,4 кДа) в 2 раза. При разделении белка на субъединицы происходит изменение их структуры, а следовательно, и размеров по отношению к нативному препарату. При разделении димера инулиназы на мономеры происходит небольшая их компактизация, и субъединицы пpaктически сравниваются по высоте.
Таким образом, результаты экспериментов по гель-хроматографии, электрофорезу и визуализации олигомерной структуры методом атомно-силовой микроскопии, позволяют сделать заключение о том, что четвертичная структура инулиназы Kluyveromyces marxianus представлена двумя субъединицами, различающимися по размерам, молекулярной массе и активности. Процессы диссоциации-ассоциации субъединиц, возможно, принимают участие в процессе регуляции каталитической активности данного фермента.
Статья в формате PDF
111 KB...
09 08 2022 23:15:45
Обзор состояния кормления и причин падежа молодняка лисиц в ООО «Покровское зверохозяйство» Республики Саха (Якутия) в 2010 г.
...
08 08 2022 22:37:52
Статья в формате PDF
110 KB...
07 08 2022 5:10:22
Статья в формате PDF
111 KB...
06 08 2022 7:46:26
Статья в формате PDF
263 KB...
05 08 2022 23:30:11
Статья в формате PDF
331 KB...
04 08 2022 2:12:59
Статья в формате PDF
109 KB...
03 08 2022 17:46:13
Статья в формате PDF
107 KB...
02 08 2022 4:13:21
Статья в формате PDF
143 KB...
01 08 2022 9:23:19
Статья в формате PDF
253 KB...
31 07 2022 21:52:38
Статья в формате PDF
243 KB...
30 07 2022 8:28:48
Статья в формате PDF
90 KB...
29 07 2022 6:25:39
Статья в формате PDF
111 KB...
28 07 2022 21:29:53
Статья в формате PDF
175 KB...
27 07 2022 3:49:11
Статья в формате PDF
108 KB...
26 07 2022 12:56:19
Статья в формате PDF
236 KB...
25 07 2022 3:20:14
Статья в формате PDF
113 KB...
23 07 2022 0:48:21
Дана хаpaктеристика цитологических особенностей нейронов дорсомедиального ядра миндалевидного комплекса мозга (МК) на стадии диэструс. Полученные результаты сравниваются с ранее полученными на стадиях эструс и метэструс. Они показывают, что функциональное состояние нейроэндокринных нейронов этого ядра МК меняется в зависимости от уровней пoлoвых стероидов.
...
20 07 2022 15:24:44
Статья в формате PDF 251 KB...
19 07 2022 19:43:54
Статья в формате PDF
255 KB...
18 07 2022 1:17:34
Статья в формате PDF
121 KB...
16 07 2022 8:13:24
Статья в формате PDF
129 KB...
15 07 2022 18:41:59
Статья в формате PDF
286 KB...
14 07 2022 18:19:42
Статья в формате PDF
110 KB...
13 07 2022 16:49:46
Статья в формате PDF
104 KB...
11 07 2022 2:20:37
Статья в формате PDF
224 KB...
09 07 2022 21:56:46
Статья в формате PDF
137 KB...
08 07 2022 14:59:34
Статья в формате PDF
140 KB...
07 07 2022 3:55:49
Статья в формате PDF
210 KB...
06 07 2022 23:22:26
Статья в формате PDF
103 KB...
05 07 2022 1:15:59
Статья в формате PDF
121 KB...
04 07 2022 3:25:15
Статья в формате PDF
101 KB...
03 07 2022 13:36:11
Статья в формате PDF
119 KB...
02 07 2022 1:47:23
Статья в формате PDF
133 KB...
29 06 2022 8:38:31
Проведено изучение показателей агрегационной активности тромбоцитов у 126 пациентов, находившихся на лечении с диагнозом острый панкреатит. Из общего количества пациентов нетяжелое течение острого панкреатита отмечено у 67 (53,1 %) больных, не тяжелое у 59 (46,8 %) пациентов. Установлено, что не зависимо от тяжести течения, отмечается усиление агрегационной активности тромбоцитов, которые полностью восстанавливаются к пятнадцатым суткам при нетяжелом течение острого панкреатита и частично при тяжелом течении этого заболевания.
...
28 06 2022 7:32:11
Статья в формате PDF
99 KB...
27 06 2022 2:50:38
Статья в формате PDF
92 KB...
26 06 2022 13:39:48
Статья в формате PDF
251 KB...
25 06 2022 16:22:31
Статья в формате PDF
121 KB...
24 06 2022 15:59:17
Статья в формате PDF
131 KB...
23 06 2022 19:38:52
Статья в формате PDF
110 KB...
22 06 2022 4:15:44
Статья в формате PDF
284 KB...
21 06 2022 7:58:47
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::
ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТОЙ СИСТЕМЫ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА
ПРИДНЯ МИХАИЛ ВАСИЛЬЕВИЧ
ТОРГОВАЯ СИСТЕМА И ИНВЕСТИЦИОННЫЕ КАЧЕСТВА ЦЕННЫХ БУМАГ
ЭРАДИКАЦИЯ HELICOBACTER PYLORI В РОТОВОЙ ПОЛОСТИ В ПРОФИЛАКТИКЕ РЕЦИДИВОВ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ
Как поменять разбитое стекло в межкомнатной двери?
ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ АППАРАТЫ СЕРИИ «БИОФОН» 
Изучение компонентов бактерицидной системы лейкоцитов у больных пиодермиями 
СИСТЕМНЫЙ АНАЛИЗ И СИСТЕМНОЕ ПРОЕКТИРОВАНИЕ В ТЕЛЕКОММУНИКАЦИЯХ