Штаммовые отличия Yersinia pestis по чувствительности к бактерицидному действию полимиксина В
Целью настоящего исследования было сравнение уровня чувствительности к полимиксину В штаммов чумного микроба с известной структурой липоолигосахаридов (Knirel et al., 2003), а также изучение взаимодействия данного катионного пептида с живыми клетками Yersinia pestis, выращенными в различных условиях, и с выделенными из них препаратами ЛОС.
Культуры чумного микроба выращивали на чашках со средой Хоттингера или в L-бульоне при температуре 25 С или 37 С. Препараты ЛОС выделяли методом C. Galanos et al. (1969). Устойчивость к полимиксину определяли методом серийных разведений в L-бульоне в 96-луночных планшетах Cellstar. Наличие роста фиксировали по увеличению оптической плотности (OD = 595 нм) на приборе Multiskan (Labsystems). Определение уровня сорбции полимиксина В живыми клетками и препаратами ЛОС, а также изучение влияния полимиксина В на проницаемость клеток для лизоцима проводили, как описано в работе M. Skurnik et al. (1999).
По уровню чувствительности к полимиксину В изученные штаммы Y. pestis подразделяются на две группы: устойчивые - минимальная подавляющая концентрация (МПК) полимиксина В > 200 мкг/мл (KM260(11), 358/12, Tjiwidej, KM218, KIMD1, Colombo, K1(780), ЕV НИИЭГ) и чувствительные -
МПК полимиксина В 6-50 мкг/мл - (EV11M, 1146,17/18, 261ЖВР, 262ЖВР). Показано, что при выращивании клеток при температуре 25 С устойчивость выше, чем при выращивании при температуре 37 С. Например, для штамма Y. pestis KIMD1 МПК полимиксина В в этих условиях составляла 12500 мкг/мл и 390 мкг/мл соответственно. Интересно, что сорбция полимиксина В живыми клетками отмечена как для чувствительных, так и для устойчивых штаммов. Однако количество сорбированного антибиотика было несколько выше для клеток чувствительных штаммов Y. pestis (1,8 мкг/103 к.о.е. при температуре 25 С и 1,98 мкг/103 при 37 С), чем для устойчивых (1,6 мкг/103 к.о.е. при температуре 25 С и 1,8 мкг/103 при 37 С). Аналогичная картина наблюдалась при изучении влияния полимиксина В на проницаемость клеток чумного микроба для лизоцима. За 1 ч инкубирования в растворе полимиксина В с лизоцимом при температуре 37 С клетки чувствительных штаммов Y. pestis лизировались на 50 %, а устойчивых - на 5 %. Сорбция полимиксина В очищенными ЛОС в большей степени хаpaктерна для препаратов, выделенных из чувствительных штаммов и выращенных при температуре 25 С.
Принято считать, что устойчивость к полимиксину В определяется присоединением арабинозы к фосфатным остаткам в составе липида А. Однако во всех изученных штаммах независимо от их чувствительности к полимиксину В преобладали популяции молекул ЛОС, к обоим фосфатным остаткам которых были присоединены арабинозные остатки. Содержание арабинозы находилось в обратной корреляции со способностью препаратов ЛОС, но не клеток, из которых они были выделены, связывать полимиксин В. Во всех устойчивых к полимиксину В штаммах выявлены популяции молекул ЛОС, в составе внутреннего отдела кора которых присутствовали четыре остатка гептозы. В чувствительных штаммах такие популяции молекул ЛОС отсутствовали.
Скрининг представительного набора природных изолятов Y. pestis, относящихся ко всем подвидам возбудителя чумы, подтвердил данные И.Л. Мартиневского и И.С. Аpaкеляна (1981) о том, что чувствительность к бактерицидному действию полимиксина В хаpaктерна для представителей подвидов caucasica и hissarica. Впервые показано, что свежие изоляты подвида altaica также чувствительны к действию полимиксина В, но утрачивают эту способность в процессе хранения. Возможно, что избирательная вирулентность штаммов Y. pestis подвидов altaica, caucasica и hissarica в значительной степени определяется их чувствительностью к антимикробным катионным пептидам, являющимся составным элементом системы врожденного иммунитета.
Работа выполнена в рамках партнерского проекта Международного научно-технического центра (ISTC) #1197p, поддержанного программой Cooperative Threat Reduction Департамента Обороны США.
Статья в формате PDF 100 KB...
25 04 2024 11:30:46
Статья в формате PDF 100 KB...
22 04 2024 11:23:12
Статья в формате PDF 114 KB...
21 04 2024 9:39:45
Статья в формате PDF 277 KB...
20 04 2024 18:34:37
Статья в формате PDF 152 KB...
19 04 2024 12:13:31
Статья в формате PDF 126 KB...
18 04 2024 7:54:40
Статья в формате PDF 216 KB...
17 04 2024 6:17:35
Статья в формате PDF 109 KB...
16 04 2024 23:52:42
Статья в формате PDF 116 KB...
15 04 2024 19:59:25
Статья в формате PDF 284 KB...
13 04 2024 21:46:52
В статье рассмотрено понятие «финансовый леверидж» и его влияние на увеличение или уменьшение прибыли и собственного капитала предприятия. ...
12 04 2024 6:34:15
Исследуется динамика причин cмepтности от сахарного диабета за период с 2000 по 2005гг по материалам отделения эндокринологии МУЗ ГКБ №3 им. С.М.Кирова. За исследуемый период наблюдалось снижение cмepтности от сахарного диабета. Непосредственными причинами cмepти от сахарного диабета послужили: диабетическая кома, гипогликемическая кома, хроническая почечная недостаточность (ХПН), гангрена, осложненная сепсисом. Наиболее частой причиной cмepти от СД в течение всего периода исследования являлась гангрена, осложненная сепсисом. ...
11 04 2024 21:38:31
Статья в формате PDF 121 KB...
10 04 2024 18:57:58
В работе методом дискриминантного анализа исследована взаимосвязь между уровнем метаболизма коллагена и особенностями поведения крыс в тесте «Открытое поле». Обнаружено, что крысы с высокой активностью процессов катаболизма коллагена делают большее число уринаций при тестировании по сравнению с другими животными. В то же время особи с высоким уровнем анаболизма коллагена проявляют в «Открытом поле» повышенную горизонтальную двигательную активность. Учет этих хаpaктеристик поведения и массы тела крыс позволяет предсказывать особенности метаболизма коллагена у животных с точностью до 85%. ...
08 04 2024 8:32:59
Статья в формате PDF 263 KB...
07 04 2024 0:32:28
Статья в формате PDF 113 KB...
06 04 2024 9:46:50
Статья в формате PDF 111 KB...
05 04 2024 20:52:24
Статья в формате PDF 119 KB...
04 04 2024 19:11:39
Статья в формате PDF 312 KB...
31 03 2024 11:47:12
Статья в формате PDF 103 KB...
30 03 2024 9:55:58
Статья в формате PDF 195 KB...
29 03 2024 9:21:19
Статья в формате PDF 239 KB...
26 03 2024 21:13:13
Статья посвящена проблемам становления новейшей лексики и орфографии новописьменного карельского языка. В статье отражены современные процессы развития лексикона, а также представлена к решению проблема так называемых послеложных падежей (элатива, аблатива, комитатива, аппроксиматива и терминатива). ...
25 03 2024 12:59:36
Статья в формате PDF 130 KB...
23 03 2024 18:44:36
22 03 2024 1:40:22
Статья в формате PDF 312 KB...
21 03 2024 13:42:44
Статья в формате PDF 129 KB...
20 03 2024 20:16:26
Статья в формате PDF 166 KB...
19 03 2024 8:13:40
Перечень веществ, обладающих cпepмицидной активностью, используемых в гинекологической пpaктике в качестве местных пpoтивoзaчaточных средств, весьма ограничен. Бензалконий хлорид, мирамистин и этоний, являющиеся бисчетвертичными аммониевыми основаниями и относящиеся к катионным поверхностно-активным веществам, то есть детергентам, обладают способностью, проявляя cпepмицидную активность, оказывать выраженное антимикробное действие. Известен в качестве cпepмицида с сочетанной антимикробной активностью ноноксинол-9. Антисептическое средство метиленовый синий – метилметионин-сульфоний хлорид – также имеет в своей структуре атом четвертичного азота и согласно литературным данным обладает cпepмицидным действием. Проведённые эксперименты по определению cпepмицидной активности антимикробных соединений позволяют предположить, что установление факта принадлежности вещества к четвертичным аммониевым основаниям априори предполагает их cпepмицидную активность и возможность применения в качестве местных пpoтивoзaчaточных средств с сочетанной антимикробной активностью. ...
18 03 2024 11:23:29
Статья в формате PDF 291 KB...
17 03 2024 5:54:45
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::