КАРДИОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПАРАФАРМАЦЕВТИКА ЛОНГОЛАЙФ-IBMED ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ИНФАРКТЕ МИОКАРДА

1

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Масловская Е.В. Балашов В.П. Кадималиев Д.А. Балыкова Л.А. Королева Ю.В. На модели экспериментального инфаркта миокарда у крыс на фоне введения препарата лонголайф-IBMED изучены изменения ЭКГ и частоты сердечных сокращений (через 1 час и через 7 суток). Показано, что испытуемый препарат обладает противоишемическим действием, улучшает коронарный кровоток в постинфарктный период, достоверно повышает выживаемость животных. Статья в формате PDF 284 KB инфаркт миокардакарнитинлонголайф-IBMED Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза Российские рекомендации (IV пересмотр) / Д.М. Аронов, Н.М. Ахмеджанов, Т.В., Балахонова и др. - М., 2009. - 80 с. Гацура, В.В., Смирнов А.Д. // Хим. - фарм. журн. - 1992. - Т. 24, № 12. - С. 10. Ишемическая болезнь сердца / под ред. И.Е. Ганелиной. - Л.: Медицина, 1977. - 360 с. Карлович Т.И., Ильченко Л.Ю. // Трудный пациент. - 2008. - №11. - С. 43. Ключников С.О. // Педиатрия, приложение Сonsilium medicum. - 2007. - №2. - С. 143. Копелевич В.М. Український біохімічний журнал. - 2005. - Т. 77, № 4. - С. 25. Кухарчук В.В. // Системные гипертензии. - 2007. - № 2. - С. 35. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник / под ред. И.П. Кондрахина. - М.: КолосС, 2004. - 520 с. Современные методы в биохимии / под ред. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1977. - 392 с. Умбрейт В.В. Манометрические методы изучения тканевого обмена: пер. с англ. / В.В. Умбрейт, Р.Х. Буррис, Д.Ф. Штауффер. - М.: Иностр. лит., 1951. - 356 с. Hagen T.M., Liu J., Lykkesfeldt J., et al. // PNAS. - 2002. - Vol. 99, № 4. - P. 1870. Iliceto S., MD, Scrutinio D., MD, Bruzzi P., MD, et al. // JACC. - 1995, August. - Vol. 26, №2. - P. 380. Loster H., Miehe K., Punzel M., Stiller O., Pankau H. and Schauer J. // Cardiovascular Drugs and Therapy. - 1999. - № 13. - Р. 537. Moore E.N., Spear I. F. // Clin. Pharmacol. Antiarrhythmic Therapy. - New-York, 1984. - P. 31. Opie L.H. // Amer. J. Cardiol. - 1975. - Vol. 36. - P. 938. Opie L.H. // Физиология и патофизиология сердца. - М.: Медицина, 1990. - С. 7-63. Sethumadhavan S., Chinnakannu P. // J. Gerontology Series A: Biological Sciences and Medical Sciences. - 2006. - Vol. 6. - P. 650.

Ежегодно в России от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) умирает более 1 млн человек, что гораздо больше, чем в развитых странах мира [7]. В связи с этим одной из важнейших задач современной кардиофармакологии является поиск эффективных методов кардиопротекции. В основе первичной и вторичной профилактики ССЗ, в том числе и инфаркта миокарда лежат мероприятия, направленные на коррекцию основных факторов риска: низкой физической активности, ожирения, липидных нарушений, повышенного артериального давления, курения и т.д. [1]. Ряд указанных факторов могут быть устранены путем применения высокоактивных биологически-активных добавок, компоненты которых, способны влиять на ключевые звенья патогенеза острой коронарной недостаточности.

Учитывая данные литературы [3, 4, 5, 11, 17] весьма перспективными являются препараты, содержащие в своем составе L-карнитин и коэнзим Q₁₀. В связи с этим наше внимание привлек парафармацевтик лонголайф-IBMED, полученный на основе активных составляющих компонентов - L-карнитина, α-липоевой кислоты, коэнзима Q₁₀, биотина и рутина. Целью настоящей работы явилось изучение кардиопротекторного действия парафармацевтика лонголайф-IBMED в сравнении с предукталом на модели экспериментального инфаркта миокарда.

Материал и методы исследования

Работа содержит два раздела. Первый раздел посвящен оценке летальности животных с экспериментальным инфарктом и динамике ЭКГ-признаков ишемии. Экспериментальный инфаркт миокарда (ЭИМ) воспроизводили на 60 беспородных крысах-самцах (массой 180-230 г), содержащихся в виварии при естественном световом режиме на стандартной диете со свободным доступом к воде. Животные были разделены на 4 группы (по 15 особей): I-я группа - интактный контроль, II-я группа - ЭИМ (без лечения), III-я группа - ЭИМ + предуктал (50,0 мг/кг) и IV-я группа - ЭИМ + парафармацевтик лонголайф-IBMED (150,0 мг/кг). Препараты вводили в крахмальной взвеси внутрижелудочно один раз в сутки курсом 5 дней до ЭИМ и один раз в сутки курсом 7 дней после ЭИМ. Интактным животным и животным без лечения вводили крахмальную взвесь.

Моделирование инфаркта миокарда проводили перевязкой левой коронарной артерии [14]. Контроль наступления ишемии миокарда проводили электрокардиографически через 1 час и на 7 сутки после окклюзии коронарной артерии. Регистрацию ЭКГ проводили с помощью полиграфа RM-6000 (Япония). ЭКГ записывали в I отведении.

Второй раздел исследования выполнен для анализа биохимических изменений в миокарде крыс через 24 часа после окклюзии коронарной артерии. В опыт включили 60 крыс, сопоставимых по полу и возрасту с животными из первого раздела исследования. Методика моделирования инфаркта миокарда и распределение животных по экспериментальным группам были аналогичными. По окончанию периода наблюдения выживших животных из каждой группы усыпляли, декапитировали, забирали кровь с гепарином и приготавливали гомогенат миокарда на трис-буфере (1:1) на холоду. Определяли активность ЛДГ в сыворотке крови животных, а также содержание малонового диальдегида (МДА), восстановленного глутатиона, гликогена, молочной кислоты, АТФ, МДА, активность каталазы, сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и интенсивность тканевого дыхания в левом желудочке сердца крыс. Описание использованных нами биохимических методов исследования приведены в [8, 9, 10].

Содержание, питание, уход за животными и выведение их из эксперимента осуществляли согласно «Правилам работ с использованием экспериментальных животных».

Результаты исследования и их обсуждение

Моделирование инфаркта миокарда у животных контрольной серии сопровождалось гибелью 6 подопытных животных (40 %). У 7 крыс из 9 выживших через 1 час после лигирования коронарной артерии регистрировали подъем сегмента ST до 2,15 ± 0,23 мм (табл. 1), что является достаточно надежным электрокардиографическим признаком возникновения острой ишемии миокарда. Препарат сравнения предуктал и лонголайф-IBMED не оказывали статистически значимого влияния на летальность животных при ЭИМ. Однако, в отличие от препарата сравнения предуктала, парафармацевтик лонголайф-IBMED существенно уменьшал развитие электрокардиографических признаков острой ишемии миокарда. У выживших животных четвертой группы - подъем сегмента ST составил лишь 1,21 ± 0,39 мм через 1 час после окклюзии коронарной артерии и на седьмые сутки - данная величина пpaктически нормализовалась.

Таблица 1. Влияние парафармацевтика лонголайф-IBMED и предуктала на летальность и частоту возникновения экспериментального инфаркта миокарда у крыс

Показатели	2 группа контроль 2	3 группа предуктал	4 группа лонголайф-IBMED
Количество выживших животных	9 (60 %)	10 (67 %)	11 (73 %)
из них с ИМ, %	7 (78 %)	6 (60 %)	5 (46 %)
Средняя величина подъема ST, мм (через 1 час после ЭИМ)	2,15 ± 0,23	1,94 ± 0,67	1,21 ± 0,39*
Средняя величина подъема ST, мм (через 7 суток после ЭИМ)	1,40 ± 0,32	1,05 ± 0,47	0,26 ± 0,12*

Примечания: * - отличия от контроля 2 достоверные при р < 0,05.

На следующей группе подопытных животных (табл. 2) мы исследовали изменения ряда биохимических показателей, отражающих степень ишемических изменений в миокарде левого желудочка крыс с экспериментальным инфарктом миокарда. Полученные результаты свидетельствуют о том, что окклюзия левой коронарной артерии существенно снижает активность аэробного метаболизма миокарда, что подтверждается падением активности СДГ в сочетании со снижением интенсивности тканевого дыхания миокарда до 37 ± 3 мкл О₂/100 мг/ч, против 60 ± 5 мкл О₂/100 мг/ч у интактных животных. Экспериментальный инфаркт миокарда приводит к снижению энергетического потенциала кардиомиоцитов - падению запасов гликогена и АТФ на фоне развивающегося лактацидоза. Комплекс указанных изменений создает условия для активации процессов перекисного окисления липидов (МДА) с параллельным снижением антиокислительных механизмов (активность каталазы и количество восстановленного глутатиона). Увеличение активности ЛДГ в плазме крови свидетельствует о развитии цитолиза кардиомиоцитов. Следовательно, биохимические маркеры, использованные нами в работе подтверждают развитие экспериментальной патологии у крыс при окклюзии левой коронарной артерии.

Препарат сравнения предуктал, и в большей степени парафармацевтик лонголайф-IBMED, существенно корригируют большинство биохимических маркеров ишемии миокарда. Парафармацевтик существенно повышал активность СДГ и интенсивность тканевого дыхания, тогда как предуктал пpaктически не улучшал активность аэробного метаболизма миокарда. Однако, оба препарата существенно повышали энергетический потенциал кардиомиоцитов. При этом предуктал более эффективно нормализовал запасы гликогена, а парафармацевтик эффективнее восстанавливал запасы АТФ. Энергообеспечивающий эффект парафармацевтика лонголайф-IBMED реализовался на фоне снижения лактацидоза, тогда как препарат сравнения не влиял на ишемически-опосредованный прирост молочной кислоты в миокарде.

Таблица 2. Некоторые биохимические показатели крови и миокарда левого желудочка крыс через 24 часа после окклюзии коронарной артерии

Показатели	1 группа контроль 1	2 группа контроль 2	3 группа предуктал	4 группа лонголайф-IBMED
ЛДГ, кровь, моль/ч/л	5,09 ± 0,31	9,17 ± 0,35А	6,62 ± 0,28*	4,87 ± 0,39*
Восстановленный глутатион, сердце, мкг/г	810 ± 10	390 ± 5А	450  ±  5	850 ± 15*
Гликоген, сердце, мг/г	24,88 ± 1,1	8,77 ± 0,86А	13,08 ± 1,01*	11,09 ± 1,84*
Молочная кислота, сердце, мкмоль/г	6,54 ± 0,99	20,4 ± 1,55А	18,53 ± 0,97	9,10 ± 1,11*
АТФ, сердце, мкмоль/г	2,24 ± 0,11	0,53 ± 0,09А	1,17 ± 0,13*	1,58 ± 0,18*
СДГ, сердце, мкг формазана/г белка/ч	140 ± 15	75 ± 10А	57 ± 14	151 ± 121*
Интенсивность тканевого дыхания, сердце, мкл О2/100 мг/ч	60 ± 5	37 ± 3А	39 ± 4	56 ± 7
МДА, сердце, нмоль/мг белка	3,63 ± 0,35	7,87 ± 0,44А	4,49 ± 0,34*	3,37 ± 0,25*
Каталаза, сердце, Н2О2/мг мин	4,62 ± 0,20	2,59 ± 0,35А	2,61 ± 0,37	4,45 ± 0,30*

Примечания: ^А - отличия от контроля 1 достоверны при р < 0,05;

* - отличия от контроля 2 достоверные при р < 0,05.

Оба препарата проявляют статистически достоверное прямое (снижают количество МДА) и опосредованное (повышают активность каталазы) антиоксидантное действие. Однако запасы восстановленного глутатиона при экспериментальном инфаркте миокарда поддерживает лишь исследуемый парафармацевтик. Нормализация метаболизма миокарда левого желудочка крыс, вызванная применением парафармацевтика обеспечивает и снижение выраженности синдрома цитолиза, о чем свидетельствует снижение в плазме крови активности ЛДГ.

Кардиопротекторный эффект парафармацевтика лонголайф-IBMED при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс, на наш взгляд можно объяснить действием преимущественно двух его компонентов - L-карнитина и коэнзима Q₁₀. Возможный механизм действия экзогенного L-карнитина, с учетом данных литературы, заключается в восстановлении нормального уровня L-карнитина в кардиомиоцитах, чрезвычайно низкого при ишемии [13], и оптимизации клеточного окислительного метаболизма [12].

Действие L-карнитина, по современным представлениям, направлено на установление баланса в окислении миокардом глюкозы и жирных кислот. При ишемии кислород используется в основном для окисления жирных кислот как основного источника ацетил-СоА, причем такое окисление в условиях дефицита кислорода происходит не полностью, что приводит к накоплению жирнокислотных производных СоА, включая ацетил-СоА, который является ингибитором пируватдегидрогеназного комплекса (ПДК). Как следствие - при ишемии активизируется анаэробный гликолиз, возможности которого в качестве источника метаболической энергии весьма ограничены, но при этом он является причиной развития лактат-ацидоза [15, 16].

L-Карнитин способствует превращению ацетил-СоА в ацетилкарнитин и таким образом удаляет мощный ингибитор ПДК. Повышение активности ПДК пролонгирует извлечение энергии за счет окисления глюкозы в условиях лактат-ацидоза [6]. Коэнзим Q₁₀, учитывая точку зрения Гацуры В.В. (1992), способствует снижению уровня лактат-ацидоза и, тем самым, проявляет синнергичноле действие L-карнитину.

 Таким образом, результаты проведенного исследования, свидетельствуют, что парафармацевтик лонголайф-IBMED обладает заметным кардиопротекторным действием, сопоставимым с эффектом препарата предуктал. Парафармацевтик не оказывает статистически достоверного влияния на выживаемость животных с экспериментальным инфарктом миокарда, но способствует снижению выраженности электрокардиографических и биохимических признаков ишемии. 

---