ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМАТОСАЛИВАРНОГО БАРЬЕРА У ДЕТЕЙ С ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

1

• Авторы
• Резюме
• Файлы

Краснова Е.Е. Чемоданов В.В. Егорова Е.Ю Горнаков И.С. Томилова И.К. Алексахина Е.Л. Изучено состояние гемато-саливарного барьера по показателям перекисного окисления липидов, оксида азота, антиоксидантной защиты и макроэлементов у детей с хроническим гастродуоденитом и функциональной диспепсией. Показано, что нарушения в функционировании барьера имеют значение в механизмах повреждения желудка и двенадцатиперстной кишки. Учитывая достоверные изменения метаболического профиля слюны, различные при воспалительных и функциональных заболеваниях гастродуоденальной зоны, предложено использовать его параметры для неинвазивной скрининговой диагностики этой патологии. Статья в формате PDF 143 KB Хронические воспалительные заболевания гастродуоденальной зоны у детей сопровождаются метаболическими нарушениями, отражающими процессы эндогенной интоксикации. Доказано, что выраженность этих нарушений коррелирует с клиническими проявлениями заболевания и данными инструментального исследования и, следовательно, может служить одним из критериев тяжести патологического процесса [7]. В связи с тем, что актуальной проблемой детской гастроэнтерологии является поиск новых информативных и в то же время неинвазивных тестов для диагностики заболеваний органов пищеварения [1], большой интерес вызывают немногочисленные данные о том, что метаболические показатели крови коррелируют с таковыми в слюне [2, 6; 11]. Более того, в этих работах показано, что саливарные тесты отражают процессы гомеостазирования, что позволяет говорить о наличии в организме гемато-саливарного барьера (ГСБ), функционирование которого, направлено на сохранение интересов целого организма или пораженного органа. Эти данные свидетельствуют о возможности использования слюны в качестве субстрата для определения хаpaктера патологического процесса в органах пищеварения. Однако сведений о комплексном изучении состояния гемато-саливарного барьера у больных с воспалительными и функциональными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки мы не встретили.

Цель исследования: установить особенности количественных изменений отдельных показателей гемато-саливарного барьера и их значимость при хроническом гастродуодените и функциональной диспепсии с тем, чтобы предложить дополнительные неинвазивные критерии диагностики этих заболеваний.

Пациенты и методы. Обследовано 125 детей с гастродуоденальной патологией в возрасте от 7 до 15 лет. В первую (основную) группу вошли 72 ребенка с хроническим гастродуоденитом, во вторую (группу сравнения) - 53 ребенка с функциональной диспепсией. Контрольную группу составили 15 здоровых детей того же возраста. Распределение больных по группам осуществляли с учётом данных клинико - эндоскопического обследования. Инфицированность Helicobacter pylori (НР) выявляли бактериоскопическим методом и уреазным тестом. Для определения функционального состояния желудка выполняли внутрижелудочную рН-метрию. Метаболический профиль крови и слюны хаpaктеризовали показателями, отражающими изменения гомеостаза. Оценивали процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) в крови и слюне по уровню диеновых конъюгатов и малонового диальдегида. Концентрацию диеновых конъюгатов определяли с помощью спектрофотометрии по Р1асеr (1968), малонового диальдегида - по его реакции с тиобарбитуровой кислотой. Состояние антиоксидантной защиты оценивали по уровню восстановленного глутатиона в крови и в слюне кадмиевым методом. Об интенсивности синтеза оксида азота (NO) судили по содержанию стабильных продуктов его окисления - нитрат-ионов, уровень которых определяли в крови и слюне потенциометрическим методом. Исследовали содержание субстрата NO-синтазных реакций - L-аргинина методом тонкослойной ионообменной хроматографии. Ионный состав (Na⁺, K⁺, Ca²⁺, Mg²⁺) крови и слюны изучали методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии. Для каждого метаболита рассчитывали коэффициент распределения, представляющий собой отношение показателей в крови и слюне. Статистический анализ полученных данных проводили с использованием пакетов прикладных программ для персонального компьютера с учетом вычислительных методов, рекомендованных для биологии и медицины. Достоверность отличий определяли по t-критерию Стьюдента.

Результаты и обсуждение. Анализ композиционных изменений в деятельности гемато-саливарного барьера при гастродуодените и функциональной диспепсии позволил определить хаpaктер его функционирования при этих заболеваниях. Установлено, что у детей в фазу обострения гастродуоденита происходит активация синтеза оксида азота и интенсификация ПОЛ, о чем свидетельствует достоверное повышение и в крови, и в слюне уровней L-аргинина и нитрат-ионов, первичных (диеновые конъюгаты) и конечных (малоновый диальдегид) продуктов ПОЛ (табл. 1). Повышение концентраций метаболитов в слюне было более выраженным, чем в крови, что отражалось на величине коэффициента распределения этих веществ. При гастродуодените он был ниже, чем в контроле. Уменьшение величины коэффициента распределения указывало на снижение активности гемато-саливарного барьера, т.е. на повышение проницаемости метаболитов из крови в слюну.

Таблица 1. Показатели метаболического профиля крови и слюны (М±m) у детей основной группы (n=72), группы сравнения (n=53) и контрольной группы (n=15)

Показатели	Группы наблюдения
	Основная группа			Группа сравнения			Группа контроля
	кровь	слюна	КР	кровь	слюна	КР	кровь	слюна	КР
L-аргинин (мкм/мл)   Нитрат-ионы (нмоль/л)   Диеновые конъюгаты (ед/мг)   Малоновый диальдегид (нмоль/л)   Восстановленный глутатион (мкмоль/л)   Кальций (ммоль/л)   Натрий (ммоль/л)   Калий (ммоль/л)   Магний (ммоль/л)	2,73×10-4 ±0,31×10-4*     3,52±0,22*     1,81±0,11*       5,34±0,22*       7,93±0,44*     2,92±0,11*   150,5±2,53*   4,32±0,11     1,85±0,23*	1,04×10-4 ±0,22×10-4*     4,54±0,46*     3,08±0,27*       3,23±0,21*       6,17±0,34*     0,49±0,02*   33,72±3,10*   28,14±2,42*     0,42±0,03*	2,63       0,78     0,59       1,65       1,28     5,96   4,46   0,15     4,40	0,39×10-4 ±0,03×10-4 *, **   2,35±0,14**     1,77*±0,14       4,84±0,24*       9,98±0,42**     2,85±0,10*   124,85±5,12**   4,10±0,09     1,35±0,12**	0,19×10-4 ±0,02×10-4 *, **   3,82±0,35     2,62±0,27*       2,52±0,14       7,03±0,35*     0,45±0,01*   16,86±1,63**   37,03±1,12**     0,39±0,03*	2,05       0,62     0,68       1,92       1,42     6,33   7,41   0,11     3,46	0,29×10-4 ±0,3×10-5     2,00±0,13     1,07±0,04       3,09±0,14       9,15±0,41     2,34±0,10   128,5±2,8   4,13±0,21     1,31±0,10	0,07×10-4 ±0,3×10-6     3,51±0,22     1,47±0,12       1,45±0,14       4,25±0,21     0,31±0,03   11,10±1,9   41,64±2,6     0,26±0,03	4,14       0,57     0,73       2,13       2,15     7,56   11,57   0,10     5,03

Примечание: КР - коэффициент распределения (рассчитан в абсолютных величинах); * - p<0,05 в сравнении с группой контроля; ** - p<0,05 в сравнении с основной группой.

В состоянии антиоксидантной защиты при хроническом гастродуодените мы наблюдали своеобразные "ножницы". Отмечалось уменьшение уровня восстановленного глутатиона в плазме и достоверное повышение его в слюне, что, на наш взгляд, являлось отражением включения компенсаторно-приспособительных механизмов, направленных на защиту пораженного органа - желудка, поскольку слюна непосредственно контактирует с его слизистой оболочкой.

При анализе метаболического профиля крови и слюны у больных гастродуоденитом отмечено, что в зависимости от давности болезни происходят разнонаправленные изменения изучаемых показателей, что согласуется с данными, полученными и другими авторами [3]. Чем меньше была длительность заболевания, тем были выше коррелирующие между собой показатели продуктов ПОЛ и оксида азота. Это подтверждает наличие тесной связи синтеза оксида азота и оксидативного стресса в организме. При этом максимальный уровень нитрат-ионов в биологических субстратах имел место при выраженной инфильтрации слизистой оболочки желудка нейтрофилами, которые, как известно, являются одним из источников синтеза NO [4].

Мы полагаем, что повышение продукции оксида азота может не только отражать наличие воспалительной реакции, но и играть определенную протективную роль в отношении слизистой оболочки, поскольку известно, что NO инициирует в ней слизеобразование, опосредует вагусную дилатацию сосудов желудка, усиливает кровоснабжение и таким образом в норме защищает слизистую от воздействия ионов водорода [5, 8].

У 16 (23%) детей с давностью заболевания более 3-х лет мы выявили снижение активности ПОЛ и синтеза NO почти в 2 раза по сравнению с менее продолжительным течением болезни, при более низкой величине коэффициента распределения этих метаболитов между кровью и слюной. В то же время известно, что подавление ПОЛ приводит к преобладанию процессов пролиферации над дифференцировкой клеток, что влечет за собой снижение резистентности слизистой оболочки желудка [6, 12]. Действительно, у этих больных чаще встречалось нeблагоприятное течение заболевания, клинически выражающееся частыми рецидивами, несильным, но упopным болевым синдромом, выраженной декомпенсацией ощелачивания в антруме. Сниженное содержание нитратов в плазме и слюне у этих больных имело обратную корреляционную зависимость (r=-0,49) от степени обсемененности НР. Возможно, недостаток оксида азота сопровождался снижением антимикробного эффекта, в результате чего отмечалось избыточное размножение бактерий. С другой стороны, известно, что некоторые штаммы НР выделяют аргиназу, способную ингибировать синтез NO в слизистой оболочке желудка, а, следовательно, при высокой степени геликобактериоза активно подавлять его продукцию [13].

У больных с длительным течением заболевания более значительным было и снижение уровня восстановленного глутатиона в обоих биологических субстратах. Концентрация его в крови была в 1,5 раза меньше, а в слюне - в 2,4 раза меньше по сравнению с недлительным течением гастродуоденита. Повышение величины коэффициента распределения глутатиона при этом указывало на утрату слюной компенсаторной функции, которую мы наблюдали у пациентов с непродолжительным сроком болезни.

Функциональная диспепсия у детей сопровождалась умеренным повышением уровней продуктов ПОЛ на фоне нормального содержания нитратов в плазме и слюне. Активность гемато-саливарного барьера в отношении этих метаболитов, определяемая по коэффициенту их распределения, существенно не отличалась от таковой в контрольной группе. А вот содержание фактора антиоксидантной защиты в слюне было достоверно выше, чем у здоровых детей, на фоне нормальных его показателей в плазме. Активность барьера по отношению к восстановленному глутатиону снижалась, свидетельствуя о повышенной проницаемости вещества в слюну.

Умеренную активацию свободнорадикального окисления при функциональной диспепсии можно рассматривать в качестве адаптационного процесса, возникающего в условиях нарушенной регуляции функций желудка, поскольку известно, что система ПОЛ играет ключевую роль не только в повреждении клеточных мембран, но и в сложном комплексе механизмов формирования адаптации и обеспечении устойчивости клеток к действию повреждающих факторов [10]. Вышеуказанное распределение антиоксиданта между кровью и слюной мы также рассматривали как проявление включения адаптационных реакций при функциональной диспепсии.

Закономерным результатом повреждения клеточных мембран в процессе активации ПОЛ является нарушение трaнcмембранных механизмов, результатом чего может стать дисбаланс макроэлементов. Так было установлено, что при обострении гастродуоденита достоверно повышалось содержание Ca²⁺, а также Mg²⁺ и Na⁺ в крови при одновременном существенном повышении их концентрации в слюне и снижении коэффициента распределения. Между тем известно, что Ca²⁺ участвует в регуляции моторики желудка, продукции соляной кислоты, синтезе оксида азота, активации апоптоза, дегрануляции тучных клеток и ряде других функций, имеющих значение в развитии воспаления в слизистой оболочке, а Na⁺ способствует усилению кислотной активности желудочного сока [9]. Кроме того, нами было отмечено снижение трaнcпорта в слюну К⁺, обладающего протективными свойствами [6], при нормальном его содержании в крови. Как видим, гемато-саливарный барьер при гастродуодените, выполняя свою гомеостатическую функцию в отношении крови, способствовал повышению повреждающих свойств слюны. При функциональной диспепсии дисбаланс макроэлементов был менее выраженным и проявлялся лишь в небольшом повышении уровня Сa²⁺ в крови и слюне, что также соответствовало умеренному повышению кислотопродукции у этих больных.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, сопоставление особенностей метаболических сдвигов в крови и в слюне у больных с воспалительными и функциональными заболеваниями верхних отделов пищеварительного тpaкта выявил композиционные различия в этих взаимосвязанных биологических средах, регулирующих гомеостаз организма. При небольшой длительности хронического гастродуоденита изменение функции гемато-саливарного барьера направлено в сторону его ослабления и накопления продуктов ПОЛ, оксида азота, Ca²⁺, Na⁺ в слюне, что снижает ее протективные свойства в отношении слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, но, возможно, является компенсаторным механизмом по отношению к целостному организму. Повышение же в слюне уровня восстановленного глутатиона отражает компенсаторно - приспособительный процесс, направленный на защиту пораженного органа. Увеличение длительности заболевания сопровождается одновременным снижением активности ПОЛ, синтеза оксида азота и антиоксидантной защиты, что проявляется уменьшением содержания их компонентов в обоих биологических субстратах и коррелирует с нeблагоприятным клиническим течением патологического процесса. Глубокий дисбаланс обмена веществ у детей с длительным «стажем» заболевания указывает на снижение резервных возможностей организма, создание условий для нарушения репаративных процессов и поддержания воспаления в слизистой гастродуоденальной зоны.

Функциональная диспепсия хаpaктеризуется меньшим спектром и выраженностью изменений параметров гемато-саливарного барьера, активность и проницаемость которого для большинства метаболитов не отличается от таковой у здоровых детей. При этом состоянии отмечается умеренная активация процессов ПОЛ на фоне повышения факторов антиоксидантной защиты, что можно рассматривать в качестве адаптационного процесса, возникающего в условиях нарушенной регуляции функций желудка.

Полученные данные подтверждают и развивают положение о значимости изменений биохимических показателей, хаpaктеризующих гемато-саливарные взаимоотношения в развитии адаптационных, компенсаторно - приспособительных и повреждающих реакций при хроническом гастродуодените и функциональной диспепсии. А достоверные различия в биохимическом составе слюны при воспалительных и функциональных заболеваниях позволяют использовать их в качестве дополнительных неинвазивных критериев для диагностики и прогноза течения этих состояний.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бapaнов А.А. //Вопр. соврем. педиатрии. 2002. Т. 1. №2. С. 9-13.
2. Булатов В.П., Зайнетдинова М.Ш., Рылова Н.В. и др. //Детская больница. 2003. № 4(14). С. 34-36.
3. Видманова Т.А. //Детское здравоохранение России: стратегия развития: Материалы IХ съезда педиатров России. М. 2001. С. 118.
4. Видманова Т.А., Шабунина Е.И., Жукова Е.А., Кулик Н.Н. //Тезисы докладов Первого Всероссийского конгресса «Медицина детям». - Н.-Новгород. 2003. С. 85.
5. Виноградов Н.А. //Рос. журнал гастроэнтерол., гепатол., колопроктол.-1997. №2. С. 6-10.
6. Ипатов Ю.П., Комарова Л.Г., Переслегина И.А., Шабунина Е.И. Ключи к проблеме гастроэнтерологических заболеваний. / Под ред. А.И. Волкова. Н.-Новгород. 1997. 217 с.
7. Парменова Л.П. //Педиатрия. 2004. №2. С. 15-19.
8. Поленов С.А. //Рос. журнал гастроэнтерол., гепатол., колопроктол.-1998. №8. С. 53-60.
9. Ребров В.Г., Громова О.А. Витамины и микроэлементы. - М.: АЛЕВ-В, 2003. - 670 с.
10. Рязанцева Н.В., Новицкий В.В. //Клинич. лаб. диагностика. 2003. №5.-С. 5-7.
11. Трифонов В.Д., Белякова Т.Д., Зубрицкая С.П., Шубин А.С. //Русс. мед. журн. 2003. Т. 11. №3 (175). С.-97-98.
12. Успенский В.М. Функциональная морфология слизистой оболочки желудка. - Л.: Наука, Ленинград. отд. 1986. 299 с.
13. Gobert A.H., McGee D.J., Akhtar M. et al. //Proc. Natl. Acad. Sci USA. 2001. Vol. 98 (24). P. 13844-13849.

---