ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ГРАНУЛОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, ПОДВЕРГАВШИХСЯ ХОЛОДОВОМУ ГИПО- И АНАБИОЗУ
Целью данной работы явилось изучение функционального состояния гранулоцитов донорских лейкоцитных концентратов, подвергавшихся холодовому гипобиозу (-100С) и холодовому анабиозу (-200С, -400С) с использованием оригинальных криозащитных растворов, не требующих отмывания от биообъекта и экспоненциальной программы охлаждения.
В состав незамерзающего хладоограждающего раствора для температуры -100С были включены следующие ингредиенты: криопротектор - глицерин, антиоксидантное средство -оксиметилэтилпиридина сукцинат (ОМЭПС), плазмозамещающий раствор - желатиноль, для доведения рН раствора до физиологической нормы 7,2-7,4 использован 2 м раствор NaOH.
Криозащитный раствор для замораживания лейкоцитов до -400С (патент РФ №2184449, 2001 г.) включал в себя: криопротектор - вещество А-378, антиоксидант - фумарат натрия и воду для инъекций, лимонную кислоту применяли для достижения рН раствора физиологической нормы.
При температуре -200С использовали раствор (патент РФ №2240000, 2004 г.), состоящий из криопротектора А-378, средства - ОМЭПС и воды для инъекций, рН раствора доводили до 7,2-7,4 с помощью 2 м раствора NaOH.
Каждый из указанных растворов смешивали в пластикатном контейнере в соотношении 1:1 с нативным донорским лейкоконцентратом, полученным путем цитафереза, выдерживали 20 мин при комнатной температуре и погружали в металлическую ванну, заполненную 960 этанолом, охлажденным до -100С (для гипобиоза) или до -280С (для анабиоза), которая находилась в электроморозильнике «Криостат». В опытах с температурой -400С (или -200С) контейнеры с биообъектом, охлажденные до -280С (или до -200С соответственно) затем переносили в холодильник на -400С (или на -200С) для дальнейшего замораживания. Экспоненциальные программы (ЭП) охлаждения (гипобиоз) или замораживания (анабиоз) биообъекта для каждой из исследуемых температур представлены на рис.1.
Таблица 1. Экспоненциальные программы (ЭП) охлаждения (гипобиоз) или замораживания (анабиоз) биообъекта
Охлажденный биообъект выдерживали при -100С до 14 суток, а замороженный при -200С до 110 суток и при -400С до 60 суток, после чего осуществляли отогрев или размораживание в 20-и литровой водяной ванне при температуре +380С в течение 2 сек (для -100С), 35-40 сек (для -200С) и 45-60 сек (для -400С) при интенсивном покачивании контейнера с биообъектом.
Установлено, что оптимальным сроком сохранения функции гранулоцитов охлажденных до -100С являются 12 суток (n=6), при которых в лейкоцитных концентратах сохраняется 82,18±3,64% гранулоцитов от исходного (до охлаждения) уровня, среди которых способностью к фагоцитозу (пробы с латексом) обладали 75,72±4,33% нейтрофилов.
Для температуры -200С оптимальным сроком являются 21 сутки (n=7), когда из 88,71±8,48%, размороженных гранулоцитов, фагоцитарная активность наблюдается у 71,67±10,82% нейтрофилов.
Наиболее благоприятным сроком сохранения функции гранулоцитов при -400С оказались 30 суток (n=7), через которые сохраненными оказались 87,29±10,83% гранулоцитов, среди них 96,0±4,00% нейтрофилов обладают способностью к фагоцитозу.
Таким образом, сохранение функции гранулоцитов крови человека возможно через разные сроки и при различных отрицательных температурах, если используются эффективные криозащитные растворы и щадящая программа охлаждения/замораживания. Предложенные криотехнологии являются доступными и не требуют дорогостоящего оборудования, поэтому могут найти применение в медицинских, микробиологических, ветеринарных и ихтиологических исследованиях.
Статья в формате PDF 107 KB...
27 04 2024 19:57:28
Предложена нестационарная математическая модель рассеяния примеси в трехслойной атмосфере (приземный, пограничный слои, слой свободной атмосферы). Приведены результаты исследования этой модели аналитическими методами в случае рассеяния легкой, сохраняющейся примеси при постоянной скорости ветра. ...
26 04 2024 7:38:55
Статья в формате PDF 265 KB...
25 04 2024 12:59:29
Статья в формате PDF 107 KB...
24 04 2024 3:11:15
Статья в формате PDF 103 KB...
23 04 2024 11:15:58
Статья в формате PDF 288 KB...
22 04 2024 23:22:18
Статья в формате PDF 104 KB...
21 04 2024 16:38:23
Статья в формате PDF 102 KB...
18 04 2024 23:41:21
Статья в формате PDF 106 KB...
17 04 2024 11:28:10
Статья в формате PDF 128 KB...
15 04 2024 6:47:13
Статья в формате PDF 113 KB...
14 04 2024 16:16:51
13 04 2024 5:19:33
В предложенной работе экспериментально доказано, что при хроническом стрессе, при нарушенном равновесии симпатического и парасимпатического отделов нервной системы, количество клеток периферической крови, изменяясь, не выходит за пределы нормы. Вегетативный баланс хаpaктеризуется средним арифметическим границ нормальных показателей. Общий клинический анализ крови является показателем функционального состояния и может быть предложен как метод, определяющий эффективность проводимого лечения в постстрессорной реабилитации. ...
12 04 2024 6:39:52
Статья в формате PDF 131 KB...
11 04 2024 17:37:54
Статья в формате PDF 120 KB...
10 04 2024 20:21:21
Статья в формате PDF 101 KB...
09 04 2024 16:16:38
Статья в формате PDF 425 KB...
08 04 2024 23:50:32
Статья в формате PDF 128 KB...
07 04 2024 14:50:41
Статья в формате PDF 136 KB...
06 04 2024 2:57:39
Статья в формате PDF 107 KB...
05 04 2024 15:45:41
Статья в формате PDF 414 KB...
02 04 2024 21:23:23
Статья в формате PDF 125 KB...
30 03 2024 19:50:43
Изложенные в статье результаты свидетельствуют о тождестве динамики формирования алкогольной зависимости у неэпилептической линии крыс (Вистар) и крыс с абсансной эпилепсией (WAG/Rij). ...
29 03 2024 9:32:16
28 03 2024 0:32:23
27 03 2024 21:22:45
Статья в формате PDF 300 KB...
26 03 2024 8:57:56
Статья в формате PDF 119 KB...
25 03 2024 1:22:52
Статья в формате PDF 235 KB...
23 03 2024 22:12:43
В течение продолжительного времени проводились триботехнические испытания различных термодиффузионных покрытий на изнашивание при трении скольжения. Они позволили сделать ряд принципиальных обобщений по взаимообусловленности структурного состояния покрытий и кинетики процессов износа. В результате моделирования фрикционных процессов широкого класса материалов было получено эмпирическое уравнение для коэффициента трения, отражающее параметрическое влияние свойств материала покрытий, реологию поверхностного трения и свойство смaзoчного материала. ...
22 03 2024 15:51:40
При помощи комплекса статистических методик произведено сравнение ряда морфометрических хаpaктеристик разных сроков статической и динамической нагрузок. Выявлен фазный хаpaктер влияния этих факторов. Полученные результаты позволяют предполагать большую дезинеграцию процессов в щитовидной железе при влиянии статической нагрузки. ...
21 03 2024 20:42:58
Статья в формате PDF 115 KB...
20 03 2024 3:51:48
Статья в формате PDF 121 KB...
19 03 2024 23:38:53
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::