ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ГРАНУЛОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, ПОДВЕРГАВШИХСЯ ХОЛОДОВОМУ ГИПО- И АНАБИОЗУ

Авторы
Файлы

Сведенцов Е.П Туманова Т.В. Степанова Е.С. Деветьярова О.Н. Щеглова О.О. Статья в формате PDF 139 KB Функциональная активность гранулоцитов после выхода из холодового гипо- и анабиоза при температуре -10⁰С÷-40⁰С не изучалась.

Целью данной работы явилось изучение функционального состояния гранулоцитов донорских лейкоцитных концентратов, подвергавшихся холодовому гипобиозу (-10⁰С) и холодовому анабиозу (-20⁰С, -40⁰С) с использованием оригинальных криозащитных растворов, не требующих отмывания от биообъекта и экспоненциальной программы охлаждения.

В состав незамерзающего хладоограждающего раствора для температуры -10⁰С были включены следующие ингредиенты: криопротектор - глицерин, антиоксидантное средство -оксиметилэтилпиридина сукцинат (ОМЭПС), плазмозамещающий раствор - желатиноль, для доведения рН раствора до физиологической нормы 7,2-7,4 использован 2 м раствор NaOH.

Криозащитный раствор для замораживания лейкоцитов до -40⁰С (патент РФ №2184449, 2001 г.) включал в себя: криопротектор - вещество А-378, антиоксидант - фумарат натрия и воду для инъекций, лимонную кислоту применяли для достижения рН раствора физиологической нормы.

При температуре -20⁰С использовали раствор (патент РФ №2240000, 2004 г.), состоящий из криопротектора А-378, средства - ОМЭПС и воды для инъекций, рН раствора доводили до 7,2-7,4 с помощью 2 м раствора NaOH.

Каждый из указанных растворов смешивали в пластикатном контейнере в соотношении 1:1 с нативным донорским лейкоконцентратом, полученным путем цитафереза, выдерживали 20 мин при комнатной температуре и погружали в металлическую ванну, заполненную 96⁰ этанолом, охлажденным до -10⁰С (для гипобиоза) или до -28⁰С (для анабиоза), которая находилась в электроморозильнике «Криостат». В опытах с температурой -40⁰С (или -20⁰С) контейнеры с биообъектом, охлажденные до -28⁰С (или до -20⁰С соответственно) затем переносили в холодильник на -40⁰С (или на -20⁰С) для дальнейшего замораживания. Экспоненциальные программы (ЭП) охлаждения (гипобиоз) или замораживания (анабиоз) биообъекта для каждой из исследуемых температур представлены на рис.1.

Таблица 1. Экспоненциальные программы (ЭП) охлаждения (гипобиоз) или замораживания (анабиоз) биообъекта

Охлажденный биообъект выдерживали при -10⁰С до 14 суток, а замороженный при -20⁰С до 110 суток и при -40⁰С до 60 суток, после чего осуществляли отогрев или размораживание в 20-и литровой водяной ванне при температуре +38⁰С в течение 2 сек (для -10⁰С), 35-40 сек (для -20⁰С) и 45-60 сек (для -40⁰С) при интенсивном покачивании контейнера с биообъектом.

Установлено, что оптимальным сроком сохранения функции гранулоцитов охлажденных до -10⁰С являются 12 суток (n=6), при которых в лейкоцитных концентратах сохраняется 82,18±3,64% гранулоцитов от исходного (до охлаждения) уровня, среди которых способностью к фагоцитозу (пробы с латексом) обладали 75,72±4,33% нейтрофилов.

Для температуры -20⁰С оптимальным сроком являются 21 сутки (n=7), когда из 88,71±8,48%, размороженных гранулоцитов, фагоцитарная активность наблюдается у 71,67±10,82% нейтрофилов.

Наиболее благоприятным сроком сохранения функции гранулоцитов при -40⁰С оказались 30 суток (n=7), через которые сохраненными оказались 87,29±10,83% гранулоцитов, среди них 96,0±4,00% нейтрофилов обладают способностью к фагоцитозу.

Таким образом, сохранение функции гранулоцитов крови человека возможно через разные сроки и при различных отрицательных температурах, если используются эффективные криозащитные растворы и щадящая программа охлаждения/замораживания. Предложенные криотехнологии являются доступными и не требуют дорогостоящего оборудования, поэтому могут найти применение в медицинских, микробиологических, ветеринарных и ихтиологических исследованиях.

СОСТОЯНИЕ СРЕДЫ ОБИТАНИЯ И ЗДОРОВЬЯ НАСЕЛЕНИЯ ЛИМАНСКОГО РАЙОНА АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ

Статья в формате PDF 121 KB...

30 10 2026 5:53:27

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ СТАТУС СИСТЕМЫ КРОВИ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ СЕРОСОДЕРЖАЩИХ ПОЛЛЮТАНТОВ

Статья в формате PDF 112 KB...

29 10 2026 7:57:57

ОСНОВНЫЕ ФАКТОРЫ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ ЭВОЛЮЦИЮ МИРА

Статья в формате PDF 92 KB...

28 10 2026 9:36:11

ВЗАИМОСВЯЗЬ СОСТОЯНИЯ ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ И НАРУШЕНИЙ РЕОЛОГИИ КРОВИ ПОД ВЛИЯНИЕМ «МЫШИНОГО» ТОКСИНА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Статья в формате PDF 97 KB...

27 10 2026 13:13:11

ХРОНИЧЕСКИЙ АЛКОГОЛЬНЫЙ ГЕПАТИТ КАК ФОРМА АЛКОГОЛЬНОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ

Статья в формате PDF 112 KB...

26 10 2026 14:57:23

ПРОБЛЕМЫ РЕДУКЦИОНИЗМА И ИНТЕГРАТИЗМА В ВУЗОВСКОЙ НАУКЕ

Статья в формате PDF 161 KB...

25 10 2026 12:54:36

Правовые аспекты эвтаназии

Статья в формате PDF 102 KB...

24 10 2026 7:47:19

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ НАЧАЛЬНЫХ ОТКЛОНЕНИЙ ФОРМЫ СФЕРИЧЕСКОЙ ОБОЛОЧКИ НА УСТОЙЧИВОСТЬ МЕТОДОМ КОНЕЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ

Статья в формате PDF 795 KB...

23 10 2026 10:45:59

ОЦЕНКА ТУРИСТСКОЙ ПРИВЛЕКАТЕЛЬНОСТИ ПРИРОДНЫХ ОБЪЕКТОВ МЕТОДОМ АНАЛИЗА ИЕРАРХИЙ (программа для ЭВМ)

Статья в формате PDF 105 KB...

22 10 2026 6:13:22

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ СТАРЕНИЯ

Статья в формате PDF 94 KB...

21 10 2026 11:15:43

КИНЕМАТИКА ЧЕТЫРЕХЗВЕННОЙ ПЛОСКОЙ ГРУППЫ АССУРА ЧЕТВЕРТОГО КЛАССА С ПОСТУПАТЕЛЬНОЙ ПАРОЙ

Статья в формате PDF 342 KB...

20 10 2026 7:57:12

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ НЕТРАДИЦИОННЫХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК

Статья в формате PDF 117 KB...

19 10 2026 13:40:21

РЕАЛИЗАЦИЯ БОЛОНСКИХ СОГЛАШЕНИЙ В РОССИЙСКОЙ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЕ

Статья в формате PDF 126 KB...

18 10 2026 8:21:58

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИМИКОТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ У ПАЦИЕНТОК С ХРОНИЧЕСКИМ РЕЦИДИВИРУЮЩИМ КАНДИДОЗНЫМ ВУЛЬВОВАГИНИТОМ

Определены виды грибов рода Candida, выделенных из влагалища у 200 пациенток с хроническим рецидивирующим кандидозным вульвовaгинитом. Приоритетными видами возбудителя являлись С. pseudotropicаlis, C. krusei ( 32,5% и 37,5%). Определена чувствительность 67 наиболее часто выделяемых штаммов при данной патологии к нистатину, амфотерицину-В, клотримaзoлу. Грибы вида C.albicans в 56% исследований были чувствительны к трем антимикотическим препаратам. Субкультуры С."не-albicans" имели маркеры устойчивости к нистатину в 57% ,амфотерицину-В в 59%, клотримaзoлу 25% исследований. ...