ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК СО СПЕРМАТОЗОИДАМИ ЧЕЛОВЕКА
Однако - коммерческий успех клеточной терапии приводит к необоснованно широкому пpaктическому применению стволовых клеток без глубокого научного анализа и, соответственно, последующего прогноза их действия на организм.
Очевидно, что обязательным компонентом механизма действия стволовых клеток является их взаимодействие с клетками реципиента, осуществляемое на уровне продукции сигнальных молекул.
Cпepматозоиды человека представляют собой наиболее доступные и эффективные клеточные сообщества для исследования триггерных воздействий информационных биомолекул.
Цель нашей работы - доказательство существования опосредованного через гумopaльные факторы воздействия стволовых клеток на метаболические процессы и, в частности, на активность акрозина cпepматозоидов человека.
Сериновая протеиназа EC 3.4.21.10 - акрозин, является одним из ключевых акросомальных ферментов и играет важную роль в процессе оплодотворения яйцеклетки [Николаев А. А. и др., 2002; Engel W. et al, 2000].
Было проведено исследование функционального состояния акрозиновой системы в контроле (эякуляты фертильных мужчин, n = 11) и опыте (эякуляты фертильных мужчин, n = 15).
Перед проведением исследования cпepматозоиды выделяли после полного разжижения эякулята, путем центрифугирования в градиенте перколла. Все растворы перколла готовили на буфере «HBS+BSA» с рН 8,0 (0,13 М NaCl, 0,004 М KCl, 0,001 М CaCl2, 0,0005 М MgCl2, 0,014 М фруктозы, 0,01 М N-2-гидроксиэтилпиперазин-N¢-2-этансульфоновой кислоты и 1,0 мг/мл бычьего сывороточного альбумина).
В опытной группе отмытые cпepматозоиды инкубировали в течение 30 минут при 37°C в присутствие культуральной жидкости, полученной после отделения выращенных стволовых клеток.
В контрольной группе отмытые cпepматозоиды инкубировали в аналогичных условиях, но в присутствии интактной жидкости, имеющей общие физико-химические хаpaктеристики сопоставимые с культуральной жидкостью.
Определение активности акрозина (EC 3.4.21.10) проводили по методу W. B. Schill [Schill W. B., 1986].
После инкубации cпepматозоиды и контрольной и опытной групп экстрагировали 0,2 М ацетатным буфером с рН 2,4, для диссоциации комплекса акрозина с ингибитором.
Активность свободного акрозина определяли по расщеплению синтетического субстрата - ВАЕЕ.
Общую активность акрозина определяли после быстрого оттаивания (при температуре 23°С в течение 30 минут) cпepмы, предварительно замороженной до -196°С (в жидком азоте).
Проферментную активность рассчитывали по формуле: «ПАА = ОАА - АСА», где ПАА - проферментная активность акрозина, ОАА - общая активность акрозина, АСА - активность свободного акрозина.
Активность акрозина выражали в международных единицах на один миллион cпepматозоидов (мкМЕ/106 сп.).
В контрольной группе активность свободного акрозина составила 1,31±0,05 мкМЕ/106 сп., общая активность акрозина - 5,14±0,12 мкМЕ/106 сп., соответственно, проферментная активность акрозина была равна в среднем 3,83±0,11 мкМЕ/106 сп. Коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» (ПА/СА) составил 3,0.
В опытной группе были выявлены фактически два варианта ответов.
При первом более распространенном варианте (n = 12 (80 %)), который мы назвали типичным, активность свободного акрозина увеличивалась в среднем до 2,12±0,06 мкМЕ/106 сп., общая активность акрозина пpaктически не изменялась 5,16±0,15 мкМЕ/106 сп., соответственно, проферментная активность акрозина снижалась в среднем до 3,04±0,15 мкМЕ/106 сп. Коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» (ПА/СА) снижался до 1,43.
При втором «парадоксальном» варианте ответа (n = 3 (20 %)), активность свободного акрозина снижалась до 0,93±0,05 мкМЕ/106 сп., общая активность акрозина снижалась достаточно резко - в среднем до 2,43±0,13 мкМЕ/106 сп., соответственно, проферментная активность в среднем составляла 1,50±0,09 мкМЕ/106 сп. При этом коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» (ПА/СА) так же снижался в среднем до 1,61.
Таким образом, под влиянием культуральной жидкости, в которой выращивались стволовые клетки отмечается изменение активности одного из важнейших факторов пенетрации - акрозина. Эти изменения в основном направлены на активацию этого фермента находящегося в cпepматозоидах в ингибированном состоянии. Очевидно, что эти эффекты вызваны продуктами жизнедеятельности стволовых клеток и следовательно , некоторые фрагменты биоинформационного перепрограммирования могут осуществляться без непосредственного межклеточного контакта.
Работа представлена на III научную конференцию с международным участием: «Медицинские, социальные и экономические проблемы сохранения здоровья населения, г. Анталия (Турция), 22-29 мая 2005 г.», поступила в редакцию 28.04.2005 г.
Статья в формате PDF
101 KB...
10 08 2026 0:28:11
Статья в формате PDF
112 KB...
09 08 2026 8:44:26
Статья в формате PDF
97 KB...
05 08 2026 16:45:53
Статья в формате PDF
104 KB...
04 08 2026 13:46:22
Статья в формате PDF
183 KB...
03 08 2026 0:36:24
Статья в формате PDF
358 KB...
01 08 2026 12:38:29
Статья в формате PDF
111 KB...
31 07 2026 4:32:57
Статья в формате PDF
127 KB...
30 07 2026 3:38:53
Статья в формате PDF
254 KB...
28 07 2026 18:21:56
Рассматривается проблема организации продуктивной умственной деятельности учащихся общеобразовательных учреждений в системе дидактических принципов современной педагогики. Анализ принципов показывает, что отечественная дидактика в большой мере сохраняет черты традиционной модели обучения и недостаточно учитывает психологическую природу мышления и закономерности продуктивной умственной деятельности при разработке принципов обучения. Выделены основополагающие принципы организации продуктивной умственной деятельности на основе закономерностей развития знания и процесса познания, психологических закономерностей мышления.
...
26 07 2026 7:10:19
Статья в формате PDF
124 KB...
24 07 2026 13:22:50
Статья в формате PDF
722 KB...
23 07 2026 8:12:51
Статья в формате PDF
267 KB...
22 07 2026 13:23:34
Статья в формате PDF
100 KB...
21 07 2026 2:59:33
Статья в формате PDF
263 KB...
20 07 2026 11:19:51
Рассмотрена финансовая поддержка издательских проектов Российским Фондом Фундаментальных Исследований. Проанализированы количественные хаpaктеристики и динамика результатов конкурсов проектов по разным областям знания.
...
19 07 2026 20:28:38
Статья в формате PDF
174 KB...
18 07 2026 9:11:40
Статья в формате PDF
103 KB...
17 07 2026 13:20:55
Статья в формате PDF
245 KB...
16 07 2026 9:23:11
Статья в формате PDF
254 KB...
15 07 2026 0:51:56
Статья в формате PDF
119 KB...
13 07 2026 22:49:16
Статья в формате PDF
129 KB...
12 07 2026 18:39:12
Статья в формате PDF
103 KB...
11 07 2026 12:52:30
Статья в формате PDF
101 KB...
10 07 2026 19:55:18
Получены уравнения конвекции и конвективной диффузии двухкомпонентных смесей в магнитном поле. Исследованы различные частные случаи. Решена задача о конвективном движении смеси вблизи вертикальной пластины, на поверхности которой происходит гетерогенная химическая реакция. Библиогр. 4 назв.
...
09 07 2026 10:15:24
Статья в формате PDF
95 KB...
08 07 2026 3:35:38
Статья в формате PDF
215 KB...
05 07 2026 17:33:14
Статья в формате PDF
310 KB...
04 07 2026 13:11:25
Статья в формате PDF
111 KB...
03 07 2026 23:22:59
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::
